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- [发明专利]一种免疫缺陷大鼠模型的构建方法-CN201710065515.3在审
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徐洋
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南方医科大学;广东圣赛生物科技有限公司
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2017-02-06
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2017-05-31
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C12N15/89
- 本发明公开一种免疫缺陷大鼠模型的构建方法,包括以下步骤将针对大鼠DNA的Prkdc和IL2Rγ基因敲除的gRNA分别进行体外转录,再分别与体外转录的CAS9蛋白mRNA混合,冻存于无RNA酶的超纯水中,得到相应的注射液A及B;将人SIRPa基因组DNA扩增,纯化,冻存于无RNA酶的超纯水中,得注射液C;采用显微注射法将注射液A和B分别注射进不同的大鼠受精卵的胞质中,将注射液C注射进另一大鼠受精卵的原核中,将三种受精卵移植入不同假孕雌鼠体内,培育分别得到第二代大鼠A,B和C;将第二代大鼠A、B和C进行杂交,繁殖F1代;再将F1代进行杂交,得到敲除了IL2Rγ和Prkdc基因并转入了人SIRPa基因的免疫缺陷大鼠模型。该大鼠模型可以让人类细胞高效植入,符合试验指标,品系背景纯正。
- 一种免疫缺陷大鼠模型构建方法
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