本发明公开了一种桑黄bHLH类转录因子Pb‑bHLH6及其编码基因与应用，属于食用菌基因工程领域。桑黄bHLH类转录因子Pb‑bHLH6氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，编码基因序列如SEQ ID NO.1所示，并且公开了该编码基因在调控桑黄三萜合成中的用途。同时还公开了一种过表达重组载体，其包含转录因子Pb‑bHLH6编码基因序列。本发明通过量表达Pb‑bHLH6的转基因桑黄菌株(T)与野生型(WT)相比，三萜含量可提高10.37％，说明所获得的转录因子Pb‑bHLH6参与桑黄三萜生物合成的调控，在实际生产中应用有助于提高桑黄三萜含量。
本发明公开一种用于桑黄遗传表达的重组载体及构建方法和遗传转化方法。载体序列如SEQ ID No:13所示。构建方法：将双元载体pCAMBIA‑1301的CaMV35S启动子替换为桑黄同源启动子,获得适用于桑黄的双元载体。遗传转化方法：利用冻融法将重组双元载体转入根癌农杆菌，获得阳性菌；利用农杆菌侵染桑黄菌丝，并在培养基上共培养，随后覆盖低熔点PDA培养基；随后将菌落转移至新的培养基，选取长势旺盛的菌落提取DNA，利用PCR技术鉴定阳性菌株。本发明具有操作简单，转化率高等优点，成功实现了桑黄的遗传转化，使得在桑黄中进行同源敲除、过表达、异源表达成为可能，解决了无法建立桑黄遗传转化体系的问题。
