本发明涉及一种病毒检测试剂盒及其使用方法,特别是一种用于检测鉴别山羊痘病毒属病毒(山羊痘病毒,绵羊痘病毒、牛结节性皮肤病病毒)的试剂盒及用于非疾病诊断目的的使用方法。本发明的检测鉴别山羊痘病毒属病毒(山羊痘病毒、绵羊痘病毒、牛结节性皮肤病病毒)的试剂盒内包括序列为SEQ ID No.1和SEQ ID No.2的特异性引物。本发明具有高特异性和高灵敏度;其性价比高,只需一对特异性引物,即可对任何扩增子上的未知突变进行筛查,相比Taq‑man探针法而言,成本大大降低,操作简便。
本发明公开一种用于检测牛结节性皮肤病的竞争ELISA抗体检测试剂盒及制备方法。本发明的试剂盒包括:包被有GTPV‑ORF117编码的抗原蛋白的酶标板,竞争抗体,酶标二抗,样品稀释液,洗涤液,显色底物,及终止液等。本发明的检测试剂盒制备方法是:以提取的山羊痘病毒GTPV基因组DNA为模板,以SEQ ID No.1和SEQIDNo.2为引物扩增得到ORF117胞外区扩增片段,将扩增片段构建到原核表达载体pET‑30a中,表达质粒转化BL21(DE3)感受态,诱导表达获得ORF117胞外区重组蛋白,并将其包被于酶标板上封闭;以ORF117胞外区重组蛋白免疫兔,收集抗ORF117蛋白兔血清制备竞争抗体。本发明具有制备方便,价格低廉,不影响诊断的效率,诊断制剂成本低的优点,可以满足我国现阶段LSD感染、爆发、防控的需求。
本发明公开一种布鲁氏菌Omp16蛋白抗原表位多肽及其用途。本发明的多肽是:其氨基酸序列中含有SEQ ID N0.1或/和SEQ ID N0.4或/和SEQ ID N0.3或/和SEQ ID N0.2或/和SEQ ID N0.5所示的序列,或者经过前述序列一个或/和几个氨基酸残基的取代和/或缺失形成的序列形成的多肽,也可以是前述序列所示的序列和添加有具有布鲁氏菌免疫源性功能的衍生的多肽。本发明的多肽可以构成的重组载体或表达盒或转基因细胞或重组菌。而本发明所涉及的各多肽可在制备诊断或预防或治疗布鲁氏菌引起的疾病的试剂或药物中的应用。本发明筛选多肽为化学合成,经刺激DC后可释放出高浓度的IL‑4,可作为目的抗原检测检测布鲁氏菌病感染的血清,或制备Omp16蛋白单克隆抗体的抗原。
本发明公开一种布鲁氏菌Omp10蛋白抗原表位多肽及其应用。本发明的多肽是:其氨基酸序列中含有SEQ ID N0.1或/和SEQ ID N0.2或/和SEQ ID N0.3或/和SEQ ID N0.4或/和SEQ ID N0.5,或者由前述序列经过一个或/和几个氨基酸残基的取代和/或缺失形成的序列形成的多肽,也可以是前述序列和添加有具有布鲁氏菌免疫源性功能的衍生的多肽。本发明的多肽可以构成的重组载体或表达盒或转基因细胞或重组菌。而本发明所涉及的各多肽可在制备诊断或预防或治疗布鲁氏菌引起的疾病的试剂或药物中的应用。本发明筛选多肽为化学合成,经刺激DC后可释放出高浓度的IL‑4,可作为目的抗原检测检测布鲁氏菌病感染的血清,或制备Omp10蛋白单克隆抗体的抗原。
本发明公开一种布鲁氏菌Yajc蛋白抗原表位多肽及其应用。本发明的多肽是:其氨基酸序列中含有SEQ ID N0.1或/和SEQ ID N0.2或/和SEQ ID N0.4或/和SEQ ID N0.5,或者由前述序列经过一个或/和几个氨基酸残基的取代和/或缺失形成的序列形成的多肽,也可以是前述序列和添加有具有布鲁氏菌免疫源性功能的衍生的多肽。本发明所涉及的各多肽可在制备诊断或预防或治疗布鲁氏菌引起的疾病的试剂或药物中的应用。本发明筛选多肽为化学合成,经刺激DC后可释放出高浓度的IL‑4,可作为目的抗原检测检测布鲁氏菌病感染的血清,或制备Yajc蛋白单克隆抗体的抗原。
本发明公开一种布鲁氏菌L7/L12蛋白抗原表位多肽及其应用。本发明的多肽是:其氨基酸序列中含有SEQ ID N0.1,或SEQ ID N0.1所示的序列经过一个或/和几个氨基酸残基的取代和/或缺失形成的序列形成的多肽,也可以是氨基酸序列为SEQ ID N0.1所示的序列和添加有具有布鲁氏菌免疫源性功能的衍生的多肽。本发明的SEQ ID N0.1多肽可以构成的重组载体或表达盒或转基因细胞或重组菌。而本发明所涉及的各多肽可在制备诊断或预防或治疗布鲁氏菌引起的疾病的试剂或药物中的应用。本发明筛选多肽为化学合成,经刺激DC后可释放出高浓度的IL‑4,可作为目的抗原检测检测布鲁氏菌病感染的血清,或制备L7/L12蛋白单克隆抗体的抗原。
本发明公开一种布鲁氏菌Omp25蛋白抗原表位多肽及其应用。本发明的多肽是:其氨基酸序列中含有SEQ ID N0.1,或SEQ ID N0.1所示的序列经过一个或/和几个氨基酸残基的取代和/或缺失形成的序列形成的多肽,也可以是氨基酸序列为SEQ ID N0.1所示的序列和添加有具有布鲁氏菌免疫源性功能的衍生的多肽。本发明的SEQ ID N0.1多肽可以构成的重组载体或表达盒或转基因细胞或重组菌。而本发明所涉及的各多肽可在制备诊断或预防或治疗布鲁氏菌引起的疾病的试剂或药物中的应用。本发明筛选多肽为化学合成,经刺激DC后可释放出高浓度的IL‑4,可作为目的抗原检测检测布鲁氏菌病感染的血清,或制备Omp25蛋白单克隆抗体的抗原。