本发明提供一种用于检测口蹄疫病毒抗体的蛋白及其应用,属于生物技术检测领域。该蛋白的序列如SEQ ID No:3所示,基因的序列如SEQ ID No:2所示。本发明还提供包含所述基因的重组载体或细胞,一种口蹄疫病毒抗体竞争ELISA检测试剂盒。所述试剂盒包括采用所述蛋白包被的酶标板和检测抗体,所述检测抗体是保藏编号为CGMCC No.45034的杂交瘤细胞株FMDV‑3B‑1分泌的。本发明建立的口蹄疫抗体竞争ELISA试剂盒,对口蹄疫抗体实现高灵敏度、高特异性的检测。
本发明提供一种非洲猪瘟病毒消毒效果的快速评价方法,属于疫病防控领域。该评价方法包括:取待检样品,添加PMA工作液和PBS缓冲液,暗处理后曝光;提取总DNA,以所述总DNA作为模板,采用ASFV‑1‑F和ASFV‑1‑R进行PCR扩增;ASFV‑1‑F序列如SEQ ID NO:1,且在5’端标记有地高辛;ASFV‑1‑R序列如SEQ ID NO:2,且在5’端标记有生物素;取PCR扩增产物与PBS缓冲液混合后,滴加于PCR试纸条的样品垫,放置后肉眼判读结果;所述PCR试纸条的检测线含有链霉亲和素,质控线含有羊抗鼠IgG抗体。本发明评价方法灵敏度高、特异性强、操作简便、耗时短且成本低。
本发明公开了一种用于金黄色葡萄球菌活菌检测的试剂、试剂盒及应用。所述检测试剂包括:引物对,包括序列分别如SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示的引物;以及探针,其序列如SEQ ID NO:1所示。所述探针的3’端标记有荧光淬灭基团,5’端标记有荧光报告基团。本发明使用了可特异性识别致病菌基因序列的扩增探针和引物对,因而具有特异性高、稳定性好的特点,本发明提供的检测方法还具有简单、快速、灵敏的优点。
本发明公开了一种用于大肠杆菌O157:H7血清型致病菌检测的试剂、试剂盒及应用。所述检测试剂包括:主要由第一引物和第二引物组成的引物对,所述第一引物和第二引物的序列分别如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2所示。本发明通过G‑四链体核酸拟酶催化底物氧化还原反应产生的颜色变化,能够以肉眼直接同时判断待测样品中是否含有大肠杆菌O157:H7,提高了检测食源性致病菌的灵敏度,使用G‑四链体核酸拟酶通过引入酶循环信号放大及PCR产物放大双重策略实现最终信号的放大,从而实现对大肠杆菌O157:H7的可视化检测。
本发明公开了一种检测试剂、试剂盒及其应用。所述检测试剂包括如下四个引物对中的任意一种或多种的组合,所述四个引物对包括:第一引物对,包括序列分别如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2所示的第一引物、第二引物;第二引物对,包括序列分别如SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4所示的第三引物、第四引物;第三引物对,包括序列分别如SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6所示的第五引物、第六引物;第四引物对,包括序列分别如SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8所示的第七引物、第八引物。本发明提供的检测方法是以标记的特异性引物扩增适当长度的基因片段,能够保证检测的高度特异性,提高了检测结果的准确性。
本发明公开了一种用于快速检测副溶血弧菌的试剂、试剂盒及其应用。所述检测试剂包括第一引物对、第二引物对、第三引物对和第四引物对;所述第一引物对包括序列分别如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2所示的第一引物、第二引物;所述第二引物对包括序列分别如SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4所示的第三引物、第四引物;所述第三引物对包括序列分别如SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6所示的第五引物、第六引物;所述第四引物对包括序列分别如SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8所示第七引物、第八引物。本发明通过G‑四链体核酸拟酶催化底物氧化还原反应产生的颜色变化,以肉眼直接观察判断待测食品中是否含有副溶血弧菌;本发明提供的检测方法具有快速、可视化、超灵敏等优点。
本发明公开了一种用于副溶血弧菌活菌检测的试剂、试剂盒及应用。所述的检测试剂包括:引物对,包括第一引物和第二引物,所述第一引物和第二引物的序列分别如SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3所示;以及,探针,其序列如SEQ ID NO:1所示;所述探针的3’端标记有荧光淬灭基团,5’端标记有荧光报告基团。本发明实施例提供的检测试剂、试剂盒在应用于检测副溶血弧菌时,具有特异性高、稳定性好等特点。
本发明公开了一种非洲猪瘟病毒的检测试剂、试剂盒及其应用。所述非洲猪瘟病毒检测试剂包括:引物对,包括序列分别如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2所示的上游引物、下游引物,所述上游引物的5’端标记有第一核酸标记物、下游引物的5’端标记有第二核酸标记物。本发明提供的检测非洲猪瘟病毒的方法是以标记的特异性引物扩增适当长度的基因片段,能够保证检测的高度特异性,提高了检测结果的准确性;并且本发明提供的检测方法避免了扩增产物稀释和探针杂交等流程,保持了免疫胶体金试纸条技术直观、快速、方便、成熟、廉价等优点。