本发明公开了一种全禽源H5N2亚型禽流感重组毒株、疫苗制备方法、疫苗组合物和应用。所述重组毒株由高致病性H5N6亚型禽流感流行毒株改造后的HA基因与H5N2亚型禽流感D7株的七个内部基因PB2、PB1、PA、NP、NA、M和NS构成；所述改造后的HA基因序列如SEQ ID NO：9所示；所述D7株的七个内部基因PB2、PB1、PA、NP、NA、M和NS的核苷酸序列依次如SEQ ID NO：1～3、5～8所示。所述重组病毒是以D7系统为骨架拯救出的重组禽流感病毒，为无致病力毒株，且能保持原来的免疫原性，可在鸡胚培养过程中保持较高的病毒滴度，完全满足生物安全性要求，具有较大的应用前景。
本发明公开了一种表达H7N9亚型高致病性禽流感病毒HA蛋白的重组火鸡疱疹病毒的构建与应用。该重组火鸡疱疹病毒为在火鸡疱疹病毒(HVT)的编码序列的非必需复制区中的HVT‑065和HVT‑066基因之间插入外源基因表达盒；其中，外源基因表达盒由MCMV启动子、外源基因和SV40 poly A依次连接而成；所述的外源基因为H7HA基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明还提供该重组火鸡疱疹病毒的构建方法，是利用超声裂解破碎的方法进行纯化，缩短筛选的时间，获得的重组火鸡疱疹病毒rHVT‑H7HA对高致病性H7N9亚型禽流感病毒提供良好的保护，可用于后续开发新型的禽流感病毒疫苗。
