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[发明专利]酵母展示脂肪酶催化合成蔗糖硬脂酸酯的方法-CN201110108787.X无效
发明人：阮晖;周陈伟;迪拉热木;徐娟;王睿之;林吉恒;何国庆 -专利权人：浙江大学
申请日： 2011-04-28 - 公布日： 2011-10-12 - 主分类号： C12P19/12 文献下载
摘要：本发明公开了一种酵母展示脂肪酶催化合成蔗糖硬脂酸酯的方法，包括：将蔗糖和硬脂酸溶于有机溶剂中，加入酵母展示脂肪酶，于50～60℃反应10～14小时，分离、纯化制得蔗糖硬脂酸酯；将经线性化处理的重组质粒转入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS 115，将所得转化子接种于BMMY培养基中，诱导培养72～144小时后离心收集菌体，菌体经冲洗、生物印迹和冷冻干燥制得酵母展示脂肪酶；本发明通过将脂肪酶展示在细胞外，利用该酶制剂催化合成蔗糖硬脂酸酯，不仅提高了转化效率，而且缩短了反应时间，降低了生产成本。
酵母展示脂肪酶催化合成蔗糖硬脂方法

[发明专利]酵母展示脂肪酶催化合成麦芽糖硬脂酸酯的方法-CN201110110339.3无效
发明人：阮晖;周陈伟;迪拉热木;徐娟;王睿之;林吉恒;何国庆 -专利权人：浙江大学
申请日： 2011-04-28 - 公布日： 2011-10-12 - 主分类号： C12P19/12 文献下载
摘要：本发明公开了一种酵母展示脂肪酶催化合成麦芽糖硬脂酸酯的方法，包括：将麦芽糖和硬脂酸溶于有机溶剂中，加入酵母展示脂肪酶，于50～60℃反应10～14小时，分离、纯化制得麦芽糖硬脂酸酯；将经线性化处理的重组质粒转入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115，将所得转化子接种于BMMY培养基中，诱导培养72～144小时后离心收集菌体，菌体经冲洗、生物印迹和冷冻干燥制得酵母展示脂肪酶；本发明通过将脂肪酶展示在细胞外，利用该酶制剂催化合成麦芽糖硬脂酸酯，不仅提高了转化效率，而且缩短了反应时间，降低了生产成本。
酵母展示脂肪酶催化合成麦芽糖硬脂方法

[发明专利]一种以微生物发酵制备三氯蔗糖的方法-CN201110064672.5无效
发明人：施立钦;邱从平 -专利权人：宁波职业技术学院
申请日： 2011-03-17 - 公布日： 2011-08-17 - 主分类号： C12P19/12 文献下载
摘要：本发明涉及一种以微生物发酵制备三氯蔗糖的方法，包括：在水苏糖中加入酵母菌，发酵培养后离心分离得甘露三糖；然后加入吡啶和氯化亚砜，经加热冷却，分离得二氯甘露三糖；以二氯甘露三糖作为唯一碳源进行大肠杆菌的筛选培养，筛选出优良菌株后再进行扩大培养；然后将预先制备好的四氯水苏糖加入到发酵培养基中，接入扩大培养的菌株，于36～37℃，通气搅拌5-25分钟，离心除菌种后超滤除蛋白，浓缩结晶得三氯蔗糖。该制备工艺简单，操作平稳，收率高；反应均为通用标准设备，投资少；每步溶剂和附料可以回收，不仅成本降低而且对环境友好。
一种微生物发酵制备蔗糖方法

[发明专利]利用超声波促进酶制剂高效转化异麦芽酮糖的方法-CN201010560797.2有效
发明人：范志刚 -专利权人：上海健源碳水化合物有限公司
申请日： 2010-11-26 - 公布日： 2011-05-25 - 主分类号： C12P19/12 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用超声波促进酶制剂高效转化异麦芽酮糖的方法，其特点是通过对酶制剂及转化液进行超声波照射来提高异麦芽酮糖转化率进而提高收率，无母液等副产物。同时给出具有超声波耐受性的转化用菌种以及增强的细胞固定化方法。本发明首先发酵红色精朊杆菌并收集菌体，然后对菌体固定化用于蔗糖的转化，在转化过程中使用超声波照射，再将该蔗糖转化液进行脱色、过滤、离子交换、浓缩和结晶或喷雾造粒，干燥后得到异麦芽酮糖成品。本发明的方法可将98%以上的蔗糖地转化为异麦芽酮糖，没有副产物，实际收率可达到100%。这大幅度地降低了生产成本，从而提高了产品的竞争力。
利用超声波促进酶制剂高效转化麦芽方法

[发明专利]一种在有机相中酶催化合成海藻糖不饱和脂肪酸二酯的方法-CN201010222645.1无效
发明人：贾承胜;李舒生;张晓鸣;冯骉 -专利权人：江南大学
申请日： 2010-07-01 - 公布日： 2011-04-27 - 主分类号： C12P19/12 文献下载
摘要：一种在有机相中酶催化合成海藻糖不饱和脂肪酸二酯的方法，属于生物化工技术领域。本发明在丙酮中利用脂肪酶NOVO435催化合成了海藻糖油酸二酯、亚油酸二酯、花生油酸二酯和芥酸二酯，确定了产物的最佳生产工艺条件和分离纯化方法。在最佳工艺条件下，海藻糖油酸二酯、亚油酸二酯、花生油酸二酯和芥酸二酯的产率分别达到56.72％、55.65％、53.21％和51.53％，分离纯化后的二酯纯度均达到99％以上。本发明方法具有条件温和、步骤简单、转化率高、产品绿色安全，易分离纯化等优点。
一种有机相中催化合成海藻不饱和脂肪酸方法

[发明专利]利用大豆糖蜜发酵生产甘露三糖和密二糖的方法-CN201010542521.1无效
发明人：徐勇虎;李睿颖;国华;王永乐;刘云;胡娅君;刘晓鸥 -专利权人：天津实发中科百奥工业生物技术有限公司
申请日： 2010-11-15 - 公布日： 2011-02-16 - 主分类号： C12P19/12 文献下载
摘要：本发明涉及一种利用大豆糖蜜发酵生产甘露三糖和密二糖的方法，实施步骤如下：（1）孢子菌悬液的制备；（2）上述孢子菌悬液用于接种至灭菌后的液体种子培养基中；（3）上述一级液体种子用于接种至灭菌后的5L种子罐中发酵培养作为二级液体种子；（4）上述二级液体种子用于接种至灭菌后的发酵罐中，将大豆糖蜜稀释作为培养基进行发酵培养；（5）将发酵液离心除菌体，用活性炭柱分离层析，进一步制备得到甘露三糖和蜜二糖晶体。本发明方法利用大豆糖蜜这种廉价原料，进行发酵生产甘露三糖和蜜二糖，有效解决了废糖蜜的利用问题；其工艺简单，产率高，质量好，成本低，不需要复杂的设备，有利于甘露三糖和蜜二糖的开发应用。
利用大豆糖蜜发酵生产甘露密二糖方法

[发明专利]一种脂肪酶催化合成蔗糖-6-乙酸酯的方法-CN201010260064.7有效
发明人：钱俊青;刘敏;罗旭 -专利权人：浙江工业大学
申请日： 2010-08-23 - 公布日： 2010-12-29 - 主分类号： C12P19/12 文献下载
摘要：本发明公开了一种脂肪酶催化合成蔗糖-6-乙酸酯的方法：按照每100毫升缓冲溶液配入7.2万～15万个酶活力单位脂肪酶，向pH值为8.1～8.7的缓冲溶液中加入脂肪酶制成酶溶液，再在酶溶液中加入有机溶剂，然后加入蔗糖使反应液中蔗糖达到饱和，搅拌溶解后加入乙酸酯类化合物，在40～65℃温度下搅拌反应，反应11～13小时补加一次乙酸酯类化合物，总共反应23～25小时反应结束，用蒸馏水洗涤后减压蒸馏，制得蔗糖-6-乙酸酯，所述乙酸酯类化合物为乙酸乙烯酯或乙酸异丙烯酯，所述酶溶液与有机溶剂的体积比为0.1～1∶100，所述有机溶剂为叔戊醇、仲丁醇或四氢呋喃。本发明通过有机溶剂的选择，并且控制反应体系中水的含量不超过1.0％，制得了高纯度的蔗糖-6-乙酸酯，纯度达75％以上，最高可达99％。
一种脂肪酶催化合成蔗糖乙酸方法

[发明专利]一种酶法制备蔗糖-6-乙酸酯的方法-CN201010230516.7有效
发明人：郑璞;孙志浩;王勍 -专利权人：江南大学
申请日： 2010-07-12 - 公布日： 2010-11-17 - 主分类号： C12P19/12 文献下载
摘要：一种酶法制备蔗糖-6-乙酸酯的方法，属于生物催化技术领域。本发明方法为在非水介质叔丁醇-二甲亚砜体系中，脂肪酶催化蔗糖与乙酸乙烯酯进行转酯反应，合成蔗糖-6-乙酸酯。本发明具有反应条件温和，反应选择性好，反应产物单一，转化率高，产品安全等优点，为生物法制备蔗糖-6-乙酸酯提供了新的可行途径。
一种法制蔗糖乙酸方法

[发明专利]连续补料发酵生产槐糖脂的方法-CN201010185605.4无效
发明人：徐勇虎;刘晓鸥;国华;李睿颖;王永乐;胡娅君;刘云 -专利权人：天津实发中科百奥工业生物技术有限公司
申请日： 2010-05-28 - 公布日： 2010-09-29 - 主分类号： C12P19/12 文献下载
摘要：本发明涉及一种连续补料发酵生产槐糖脂的方法，步骤如下：(1)孢子悬液的制备：将球拟酵母菌TJZKBA10326接种到斜面上，于30℃恒温培养2-4天，加入0.75%的生理盐水洗涤菌丝体，获得菌悬液，悬液中孢子含量约为105-106个；(2)上述菌悬液用于接种至灭菌后的液体种子培养基中得到液体种子；(3)上述液体种子培养基用于接种至灭菌后的5L发酵罐中发酵；(4)发酵24-72h之间，每12h补加浓度为30-60g/L的油类；发酵过程中，补加浓度为30-60g/L的葡萄糖，控制葡萄糖浓度在5-10g/L；溶氧20-30%，pH值3.3-3.8；(5)发酵72h后，用与发酵液等体积的乙酸乙脂/异丙醇，比例4：1，单位v/v，混合有机溶剂提取槐糖脂，并抽真空除去有机溶剂，得槐糖脂产量为200-240g/L。该方法缩短发酵周期，提高生产效率和得率。
连续发酵生产糖脂方法

[发明专利]一种海藻糖的生产方法-CN201010137964.2有效
发明人：王瑞明;马春玲;王腾飞;李丕武;徐汝意 -专利权人：山东轻工业学院
申请日： 2010-04-02 - 公布日： 2010-09-15 - 主分类号： C12P19/12 文献下载
摘要：本发明涉及一种海藻糖的生产方法，特别是一种利用恶臭假单胞菌生产海藻糖的方法，属于发酵工程及微生物技术领域。一种利用恶臭假单胞菌生产海藻糖的方法，包括恶臭假单胞菌培养步骤、β-巯基乙醇处理步骤和发酵步骤。本发明以麦芽糖为底物，通过制备恶臭假单胞菌的透性细胞，利用其细胞内海藻糖合酶将麦芽糖一步转化为海藻糖。经测定，用β-巯基乙醇处理的恶臭假单胞菌透性细胞溶液中约有3％-5％的海藻糖生成。
一种海藻生产方法

[发明专利]一种提高酵母细胞海藻糖含量的方法-CN201010146889.6有效
发明人：王瑞明;王腾飞;马春玲;李丕武;徐汝意 -专利权人：山东轻工业学院
申请日： 2010-04-15 - 公布日： 2010-09-01 - 主分类号： C12P19/12 文献下载
摘要：本发明涉及一种提高酵母细胞海藻糖含量的方法，将酵母发酵培养液离心分离获得13-17％的细胞浓度的酵母乳，向酵母乳中添加麦芽糖、氯化钠和氯化钙的水溶液，在35℃、pH5.2、1.0-1.2vvm通风条件下培养2-3小时，离心收集酵母泥，所得酵母中海藻糖含量达16％以上，本发明可以在较短时间内，使酵母细胞内的海藻糖从8％提高到16％以上，较现有工艺缩小了发酵时间、节省了发酵设备和动力消耗。
一种提高酵母细胞海藻含量方法

[发明专利]用啤酒废酵母制备酵母多糖、海藻糖及酵母抽提物的方法-CN200910036820.5无效
发明人：朱明军;梁世中;方贵权;田小群 -专利权人：华南理工大学;广州珠江啤酒股份有限公司
申请日： 2009-01-20 - 公布日： 2009-07-15 - 主分类号： C12P19/12 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用啤酒废酵母同时制备酵母多糖、海藻糖及酵母抽提物的方法。该方法包括啤酒废酵母脱苦去杂质，啤酒废酵母的自溶以及酶解与灭活，酵母多糖的分离和干燥，海藻糖的膜分离、浓缩、结晶及干燥，酵母抽提物的浓缩及干燥等步骤。该方法具有原料利用率高、品质好、成本低、易于产业化的特点，实现了从同一种工业废弃物——啤酒废酵母同时生产出酵母多糖、海藻糖和酵母抽提物三种产品，提高了工业废弃物的利用率，达到了废弃物最大资源化的目的。
啤酒酵母制备多糖海藻抽提物方法

[发明专利]一种大黄欧文氏菌及其在制备异麦芽酮糖中的应用-CN200710190755.2有效
发明人：徐虹;李莎;环民霞;林璐;蔡恒;欧阳平凯 -专利权人：南京工业大学
申请日： 2007-11-29 - 公布日： 2008-06-18 - 主分类号： C12P19/12 文献下载
摘要：本发明公开一种大黄欧文氏菌(Erwiniarhapontici)NX－5及利用该菌生产蔗糖异构酶进而制备异麦芽酮糖的方法。将该菌株CGMCC No.2222接种于含碳源、氮源、无机盐和水的无菌培养基中进行好气培养，离心或超滤获得含蔗糖异构酶的细胞，进而直接采用游离的含蔗糖异构酶的细胞转化蔗糖生成异麦芽酮糖或固定化含蔗糖异构酶的细胞后转化蔗糖生成异麦芽酮糖。采用该菌株使蔗糖转化率高达99.5％(w/w)，异麦芽酮糖转化率达90％，转化液中异麦芽酮糖浓度达500g/L，无水解副反应，转化液中几乎不含葡萄糖和果糖，随着反应进行也不会使产物异麦芽酮糖转化为其他成分，对工业化生产异麦芽酮糖十分有益。
一种大黄欧文及其制备麦芽中的应用

[发明专利]非还原性糖类生成酶及其制备和应用-CN200710180720.0无效
发明人：丸田和彥;久保田伦夫;杉本利行;三宅俊雄 -专利权人：株式会社林原生物化学研究所
申请日： 1994-06-27 - 公布日： 2008-05-28 - 主分类号： C12P19/12 文献下载
摘要：公开了一种新的非还原性糖类生成酶及其制备和应用。这种酶可从Rhizobium Sp.M－11(FERMBP4130)和Arthrobacter Sp.Q36(FERM BP－4316)等微生物的培养物中获取，当其作用于还原性淀粉部分水解产物时可生成具有海藻糖结构的非还原性糖类。当葡萄糖淀粉酶和α－葡糖苷酶作用于这种非还原性糖类时，易于产生海藻糖。这种非还原性糖类和海藻糖可广泛应用于食品、化妆品和药品中。
原性糖类生成及其制备应用

[发明专利]一种用共固定化乳糖酶和葡萄糖异构酶制备乳果糖的方法-CN200710134999.9无效
发明人：杨瑞金;刘芳 -专利权人：江南大学
申请日： 2007-11-02 - 公布日： 2008-05-21 - 主分类号： C12P19/12 文献下载
摘要：一种用共固定化乳糖酶和葡萄糖异构酶制备乳果糖的方法，属于食品生物技术领域。本发明是利用共固定化乳糖酶和葡萄糖异构酶为催化剂，以乳糖为单一底物，在温和的反应条件下转化乳糖制备乳果糖。本发明的独特之处是以乳糖作为底物，在反应过程中利用乳糖酶和葡萄糖异构酶的协同作用，提高制备乳果糖的反应效率，减少副产物，简化下游分离步骤。本发明思路新颖，环境友好，实用性强，是化学法和游离酶法制备乳果糖的良好替代。
一种固定乳糖酶葡萄糖异构酶制备果糖方法

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