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[发明专利]SJ000291942在诱导间充质干细胞成骨分化方面的应用-CN202210766094.8有效
发明人：刘中民;贾文文;朱邯豫;鲍嫣;汤红明 -专利权人：上海市东方医院（同济大学附属东方医院）
申请日： 2022-06-30 - 公布日： 2023-09-26 - 主分类号： C12N5/077 文献下载
摘要：本发明属于细胞培养技术领域，具体涉及SJ000291942在诱导间充质干细胞成骨分化方面的应用。本发明SJ000291942为小分子化合物，分子式为C16H15FN2O4，具有易获得、结构可控、降低成本等特点，可以体外促进脐带间充质干细胞、脂肪间充质干细胞和iPSC衍生间充质干细胞等多种间充质干细胞的成骨分化。间充质干细胞经含有SJ000291942的培养基成骨诱导分化18～28d后，可以获得具有数量优势的骨组织工程细胞，缩短了间充质干细胞成骨分化时间，提高了分化效率。
sj000291942 诱导间充质干细胞分化方面应用

[发明专利]一种人上颌窦黏膜固有层间充质干细胞的提纯方法及应用-CN202310732986.0在审
发明人：周延民;吕慧欣;孙晓琳;王一涵;刘修玉;陈静霞 -专利权人：吉林大学
申请日： 2023-06-20 - 公布日： 2023-09-22 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明适用于生物医疗技术领域，提供了一种人上颌窦黏膜固有层间充质干细胞的提纯方法，包括以下具体步骤：步骤1、细胞提取；步骤2、传代；步骤3、细胞的冻存和复苏。该方法发现并提取培养了人源上颌窦黏膜固有层间充质干细胞，黏膜单一亚层体外培养，区别于目前将上颌窦全层进行体外培养的方式。并同步将该细胞进行了成骨功能验证，证明其可以成骨分化，具有骨组织工程应用前景。
一种上颌黏膜固有层间充质干细胞提纯方法应用

[发明专利]一种生产脐带血外泌体的方法-CN202310763216.2在审
发明人：魏伟;李永生 -专利权人：广州市天河诺亚生物工程有限公司
申请日： 2023-06-27 - 公布日： 2023-09-22 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明公开了一种生产脐带血外泌体的方法。所述方法包括：将间充质干细胞和温敏微载体接种于含有脐带血血浆的培养基中进行培养，培养后收集间充质干细胞悬液进行离心得到外泌体。本发明首次利用温敏微载体在含有脐带血血浆的培养容器中培养间充质干细胞，可以极大地提高外泌体产率，脐带血血浆的利用使得间充质干细胞和外泌体更加安全且适合临床应用，温敏技术的应用使得间充质干细胞分离时免受胰酶等化学物质的伤害，有利于提高外泌体产率和均一性，能够获得更多具有生物学活性的外泌体，可实现规模化的外泌体获取与外泌体的规模化制备。
一种生产脐带血外泌体方法

[发明专利]纤维质农副产物在制备细胞培养肉支架中的应用-CN202310766305.2在审
发明人：徐恩波;忻启谱;刘东红;牛瑞浩;陈启和;陈军;陈敏暄;尹俊;朱旸 -专利权人：浙江大学
申请日： 2023-06-27 - 公布日： 2023-09-22 - 主分类号： C12N5/077 文献下载
摘要：本发明涉及纤维质农副产物在制备细胞培养肉支架中的应用，纤维质农副产物包括米糠、小麦麸皮、玉米种皮等，制备过程中需加入常见的水凝胶前驱体溶液，如海藻酸钠、明胶、卡拉胶或其复合体系。本发明中制备的支架可以诱导细胞迁移，提高细胞增殖效率；针对明胶依赖性细胞，可以极大降低明胶用量，同时改善支架质构特性；此外，本发明涉及的原料价格低廉，制备方法简单高效无毒，有利于促进粮食减损增效和国民营养健康，同时降低细胞培养肉的生产成本，适用于大规模实施应用。
纤维副产物制备细胞培养支架中的应用

[发明专利]一种利用小分子药物诱导心肌细胞重编程为心脏祖细胞的方法-CN202310777127.3在审
发明人：丁胜;周伟;马天骅 -专利权人：清华大学
申请日： 2023-06-28 - 公布日： 2023-09-22 - 主分类号： C12N5/077 文献下载
摘要：本发明涉及利用小分子药物诱导心肌细胞重编程为心脏祖细胞的方法。本发明提供了一种体外诱导人胚胎干细胞(hESCs)向心肌细胞(CMs)分化的方法以及小分子药物组合在诱导心肌细胞去分化为心脏祖细胞中的用途。本发明成功构建了基于hESCs来源的CMs的高通量小分子药物筛选平台。本发明运用CRISPR‑Cas9技术以基因敲入的方式构建了分别来源于男性和女性的基因敲入ISL1mCherry/+人胚胎干细胞系K7和K9。另外，本发明在体外实现了由两个小分子化合物CHIR99021和A‑485的组合对心肌细胞向心脏祖细胞的转变，并且还在体外实现了对心肌细胞向心脏祖细胞转变的谱系追踪。本发明在哺乳动物体内验证了小分子药物组合2C诱导哺乳动物心脏中心肌细胞向心脏祖细胞的去分化。
一种利用分子药物诱导心肌细胞编程心脏方法

[发明专利]一种经血源干细胞外泌体递送体系及其制备方法和应用-CN202310787226.X在审
发明人：任亚辉;宋巍;程美蝶;张思瑾;梁云 -专利权人：河南城建学院
申请日： 2023-06-29 - 公布日： 2023-09-22 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明公开了一种经血源干细胞外泌体递送体系及其制备方法和应用，具体涉及生物技术领域。所述方法包括1)MenSCs的分离以及培养；利用MenSCs制备外泌体并进行外泌体‑化学药物递送体系的构建，经稳转miRNA的MenSCs细胞株的构建后miRNA‑外泌体递送体系的构建，或经稳转溶瘤病毒的MenSCs细胞株的构建后溶瘤病毒‑外泌体递送体系的构建。本发明所用外泌体来源于经血源干细胞，经血源干细胞取材方便，无伦理和特殊条件限制，对身体无损伤，细胞分离培养简单，易于在体外大量扩增。同时，外泌体携带大量干细胞内的生物分子，免疫原性低于干细胞，既能发挥干细胞的治疗效果又能避开干细胞移植带来的免疫排斥等潜在风险。操作简单，节省成本，提高效率、使用方便。
一种经血干细胞外泌体递送体系及其制备方法应用

[发明专利]一种用于毛囊活化的间充质干细胞培养方法-CN202310819182.4在审
发明人：何文丽 -专利权人：上海中赛德康生物制药有限公司
申请日： 2023-07-05 - 公布日： 2023-09-22 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明涉及间充质干细胞培养技术领域，且公开了一种用于毛囊活化的间充质干细胞培养方法，包括下列步骤：S1：取新鲜采集的人腿部脂肪组织液体100ml静置6‑10min后分层，移除下层富含红细胞的液体，保留上层脂肪组织液体；S2：用添加有青霉素和链霉素的β‑甘油磷酸钠溶液50ml对上层脂肪组织液体进行重置分层；解决了目前市场上的自体脂肪来源用于毛囊活化的间充质干细胞培养效果较差的问题；本发明成功从人腿部脂肪组织提取并培养了用于毛囊活化的脂肪间充质干细胞，该方法简单，效率高，制备的脂肪间充质干细胞具有毛囊活化和修复的功能，为将来实现毛囊移植和毛囊修复打下了良好的基础，适合被广泛推广和使用。
一种用于毛囊活化间充质干细胞培养方法

[发明专利]一种单因素细胞命运调控模型的构建方法-CN202310679968.0在审
发明人：吴月皓;智伟;吴金结;朱秀鹏;方鑫;黄旭;彭雪松;汪建新;郭行;易若萱 -专利权人：西南交通大学
申请日： 2023-06-09 - 公布日： 2023-09-22 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明公开了一种单因素细胞命运调控模型的构建方法，属于生物技术领域，包括以下步骤：获得种子细胞；制备无细胞粘附位点的水凝胶溶液；构建单因素力学刺激调控模型；具体包括以下步骤：将种子细胞接种到水凝胶溶液中，并通过交联溶液交联形成水凝胶，并培养得到细胞/水凝胶复合物；将孵育后的细胞/水凝胶复合物置于微振动培养装置内，给予力学刺激。通过上述方式，本发明通过水凝胶对细胞的包埋，有效排除了流体剪切应力对细胞的影响，由于模型屏蔽流体剪切应力对细胞的应力作用，使细胞仅受到基质应力传递这一单一因素的力学作用，从而促进对于力学调控机制的深入理解。
一种因素细胞命运调控模型构建方法

[发明专利]一种胶原结合型的外泌体、外泌体冻干粉及制备方法-CN202310688610.4在审
发明人：吕红斌;石新;许琰;胡建中 -专利权人：中南大学湘雅医院
申请日： 2023-06-12 - 公布日： 2023-09-22 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明涉及外泌体制备技术领域，具体公开了一种胶原结合型的外泌体，外泌体的制备方法包括：构建重组表达载体pHBLV‑CMV‑CD63‑EF1‑ZsGreen‑T2A‑puro，重组表达载体的核苷酸序列包括如SEQ ID NO:1所示；将重组表达载体转染干细胞，使干细胞分泌出具有胶原结合特性的外泌体。本发明制备得到的外泌体能很好地靶向损伤处的胶原，从而能更稳定的发挥作用。本发明还公开了外泌体冻干粉，可常温长期保存和运输，且可有效保留活性，能广泛方便使用于多种损伤修复，使用方便，用途广泛。
一种胶原结合外泌体外泌体冻干粉制备方法

[发明专利]一种脂肪类器官培养方法-CN202310979282.3在审
发明人：耿志军;宋雪;李静;许轶博;孙洋;张小凤;左芦根;王炼;王月月;赵天豪;杨晶晶;殷丽霞 -专利权人：蚌埠医学院第一附属医院（蚌埠医学院附属肿瘤医院）
申请日： 2023-08-05 - 公布日： 2023-09-22 - 主分类号： C12N5/077 文献下载
摘要：一种脂肪类器官培养方法，包括以下步骤：用含有4％青链霉素的Hanks缓冲液清洗脂肪组织，剔除红色血管和白色纤维组织，剪碎组织呈大小约为1mm3的脂肪块；将封口膜放入模具中按压，在封口膜上形成若干圆底的凹槽孔，并加入20μL基质胶；在每个凹槽孔内的基质胶中加入1～3个脂肪块，置于37℃的培养箱中静置1h，待基质胶凝固后取出，放入含有22mL脂肪培养基的6孔板中，放入培养箱中进行培养，该方法制备出的脂肪类器官重现了脂肪器官的一些关键细胞类型和结构特征，为后续脂肪组织的研究提供了基础，而且方法本身步骤简单，易操作。
一种脂肪器官培养方法

[发明专利]一种间充质干细胞培养液制备工艺-CN202311015454.1在审
发明人：王知源;王广平;梁敏;石波云 -专利权人：广州医科大学附属第五医院（广州再生医学与健康广东省实验室附属医院）
申请日： 2023-08-14 - 公布日： 2023-09-22 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明公开了一种间充质干细胞培养液制备工艺，需准备配置细胞培养液所需的原液瓶用于盛放基础培养基；将基础培养基通过移液管和胎牛血清混合并加入营养物质和缓冲剂形成完全培养基；将所有耗材在121℃高压蒸汽下灭菌30mi n以上，同时将操作台面、手套、药品瓶口用70％乙醇擦拭；按照培养基配方的要求称量并加入适量的无菌纯水，混合均匀后用0.2um过滤器过滤灭菌；将经过消毒和质检的补充物根据所需比例加入到基础培养液中并再次通过过滤器消毒过滤；用NaOH或HC l等调节剂将培养基的pH值调至7.2‑7.4，并将将制作好的间充质干细胞培养基分装到无菌试管或瓶中，培养并提取人多发性骨髓瘤RPMI8226和U266细胞上清液制备条件培养液，配方简单，不会受到动物病毒污染。
一种间充质干细胞培养液制备工艺

[发明专利]一种提高间充质干细胞功能及分泌生长因子能力的方法-CN202210425021.2在审
发明人：田程;曹森;何虹瑜;赵自文 -专利权人：郑州普若提生物科技有限公司
申请日： 2022-04-22 - 公布日： 2023-09-22 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明涉及以医疗技术领域，公开了一种提高间充质干细胞功能及分泌生长因子能力的方法，本发明通过收集和培养；制备诱导间充质干细胞培养液，以高糖DMEM为基础培养基，然后加入胎牛血清、青‑链霉素和具有表皮细胞生长因子和胰岛素样生长因子的生长因子；将诱导间充质干细胞培养液加入到培育的间充质干细胞中；清洗间充质干细胞；制备充质干细胞制剂这一系列过程的设置，通过采用不同位置的含有不同间充质干细胞组织和配置诱导间充质干细胞培养液的设置，使最终得到的充质干细胞制剂内部的间充质干细胞功能性得到大大增强，可以使间充质干细胞制剂中的间充质干细胞浓度较高，使间充质干细胞的分泌生长因子能力进一步提升。
一种提高间充质干细胞功能分泌生长因子能力方法

[发明专利]一种高效制备高活性脐带间充质干细胞的方法-CN202210425019.5在审
发明人：田程;曹森;贺国瑞;王玮玮 -专利权人：郑州普若提生物科技有限公司
申请日： 2022-04-22 - 公布日： 2023-09-22 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明涉及间充质干细胞制备技术领域，且公开了一种高效制备高活性脐带间充质干细胞的方法，包括原料采集，收集妊辰时长为37周至42周后分娩的胎儿的脐带，将其放入采集管内，使用酒精进行初步的消毒处理，随后将其放入清洁器皿中，向清洁器皿中注入浓度为0.85%的生理盐水中进行保存；原料转运，随后将清洁器皿放入到恒温箱内，将恒温箱运转至无菌实验室内。该高效制备高活性脐带间充质干细胞的方法，整体的操作过程简单，并且在培养的过程中能够保证原代细胞的迁出率，并且经济成本较低，消化时间短，消化率易于进行把控，避免出现细胞贴壁率降低并且大量死亡的现象，并且培育出的细胞活性高，更加的便于后续临床治疗过程中使用。
一种高效制备活性脐带间充质干细胞方法

[发明专利]低氧型干细胞球的培养方法-CN202310811671.5在审
发明人：裴可;颉丽英;蔺宝;何跃腾;刘春桃;蔡车国;胡隽源 -专利权人：深圳市北科源细胞科技有限公司
申请日： 2023-07-04 - 公布日： 2023-09-22 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明公开一种低氧型干细胞球的培养方法，涉及生物医药技术领域，该低氧型干细胞球的培养方法包括如下步骤：S1、细胞扩增与低氧赋能；向干细胞加入培养基稀释后混悬细胞，离心，离心结束后加入干细胞培养基进行铺板；干细胞在低氧条件下进行培养并传代，细胞传代时低氧环境维持在2％‑8％的氧气体积浓度；传至P4代后，收集赋能后的干细胞；S2、诱导干细胞成细胞球；收集2％‑8％赋能的P4代的干细胞转移至低氧条件连续进行培养；通过在低氧赋能培养条件获得的干细胞球表现出更高的细胞存活率和更好的功能表达；干细胞球提供了更接近体内骨关节组织的低氧环境，有助于维持干细胞的稳定性和功能。
低氧干细胞培养方法

[发明专利]一种调控C/EBPα基因表达的方法及C/EBPα表达抑制剂-CN202210230380.2有效
发明人：李海龙;李湘怡;刘爱霞;文欢;郑秀炆;周明艳;张钰昕;张俊清;张旭光;白飞虎 -专利权人：海南医学院
申请日： 2022-03-09 - 公布日： 2023-09-22 - 主分类号： C12N5/077 文献下载
摘要：本发明公开一种调控C/EBPα基因表达的方法及C/EBPα表达抑制剂，通过1,7‑二苯基‑4‑庚烯‑3‑酮和/或其衍生物处理细胞以调控细胞C/EBPα基因表达。所述衍生物为5‑羟基‑1,7‑二苯基‑4‑庚烯‑3‑酮。该方法操作简便，给药浓度较低，效果明显，易于推广应用。该方法的提出为C/EBPα基因功能的研究及相关疾病的治疗建立基础。
一种调控 ebp 基因表达方法抑制剂