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[发明专利]用于治疗阿兹海默症的医药组合物-CN202310061159.3在审
发明人：黄奇英;蔡侑珍;庄明熙;林珀丞 -专利权人：国玺干细胞应用技术股份有限公司;黄奇英
申请日： 2023-01-17 - 公布日： 2023-07-28 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明提供一种用于治疗阿兹海默症的医药组合物，其至少包含有细胞外囊泡，且所述细胞外囊泡的制备方法如下：第一培养步骤：将脂肪间质干细胞以6,000～15,000个细胞/cm2的细胞密度在一第一培养基中扩增培养，直到所述脂肪间质干细胞的扩增数量为培养前的90％以上；第二培养步骤：将扩增后的所述脂肪间质干细胞以10,000～100,000个细胞/cm2的细胞密度在一第二培养基中培养20～30小时；细胞外囊泡分离步骤：收集所述培养液并利用切向流过滤法(TFF)或超滤法从所述培养液中分离出所述细胞外囊泡。
用于治疗阿兹海默症医药组合

[发明专利]一种牙髓间充质干细胞培养基添加物、培养基及其应用-CN202310540616.7有效
发明人：龙丹;杨宗泽;周彦妮;冯莉;李胜富 -专利权人：四川大学华西医院
申请日： 2023-05-15 - 公布日： 2023-07-28 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明公开一种牙髓间充质干细胞培养基添加物、培养基及其应用，属于生物工程技术领域，所述添加物为miRNA激动剂，所述miRNA激动剂包括miR‑144 agomir、miR‑204 agomir、miR‑298 agomir中的一种或两种以上的组合。进一步的，本发明公开的一种牙髓间充质干细胞培养基是通过向基础培养基中添加所述miRNA激动剂制备得到。本发明提供的牙髓间充质干细胞培养基添加物可有效提高原代牙髓间充质干细胞的扩增速度，使用所述添加物制备得到的培养基可使细胞稳定传代至15代以上，获得的细胞表型稳定，保持其分化潜能。
一种牙髓间充质干细胞培养基添加物及其应用

[发明专利]一种祛斑除皱的干细胞外泌体微针贴片及其制备方法-CN202011148113.8有效
发明人：唐忆琳;华佩君;陈巧林 -专利权人：中科细胞科技（广州）有限公司
申请日： 2020-10-23 - 公布日： 2023-07-28 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明公开了一种祛斑除皱的干细胞外泌体微针贴片，包括微针和用于固定微针的防水背衬层；所述微针由针尖溶液、针体溶液固化得到；针尖溶液包括干细胞外泌体、虾青素、海藻糖、壳聚糖、牛血清白蛋白、磷酸盐缓冲液；针体溶液包括PVP K30、PEG400、角鲨烷和无菌水。本发明的微针贴片能够穿透皮肤角质层屏障，为大分子药物提供了新型的给药途径，解决了外泌体修复液透皮吸收问题；微针贴片并能够缓慢释放外泌体修复液，提高机体的吸收率；微针贴片具有良好的穿刺性、可溶性及生物学活性，且操作简单，易于保存，可大规模生产。
一种祛斑干细胞外泌体微针贴片及其制备方法

[发明专利]一种干细胞外泌体提取试剂盒以及提取方法-CN202310454454.5在审
发明人：李琴;高傲杰;丁丁 -专利权人：安徽国科门生物科技有限公司
申请日： 2023-04-25 - 公布日： 2023-07-25 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明公开了一种干细胞外泌体提取试剂盒，所述试剂盒包括：沉淀剂PEG、PDDA包覆PS微球、第一缓冲液、第二缓冲液、第三缓冲液。本发明还公开了使用该试剂盒对干细胞外泌体进行提取的方法。本发明提取干细胞外泌体具有成本低、操作简单且纯度高的特点，适合大规模应用。
一种干细胞外泌体提取试剂盒以及方法

[发明专利]一种动物脂肪组织细胞核提取试剂盒及其制备方法和应用-CN202310455553.5在审
发明人：梁健;戴寒琪;张鋆;盛金杰 -专利权人：杭州联川生物技术股份有限公司
申请日： 2023-04-25 - 公布日： 2023-07-25 - 主分类号： C12N5/077 文献下载
摘要：本发明公开了一种动物脂肪组织细胞核提取试剂盒及其制备方法和应用，属于分子生物学技术领域。所述动物脂肪组织细胞核提取试剂盒包括细胞核裂解液，所述裂解液中含有0.3~1mM梯度离心试剂、30~100mM柠檬酸、0.1~1mM DTT和0.1~1U/μL RNA酶抑制剂，利用无核酸酶水进行配制；进一步还包括细胞核纯化液，所述细胞核纯化液中含有0.2~2% BSA、0.5~2mM DTT、1~3U/μL RNA酶抑制剂，利用DPBS进行配制。本发明的试剂盒原材料易获得，价格低廉，试剂组分具有良好生物相容性，无有害成分，安全环保，适用于脂肪组织细胞核提取。本发明的动物脂肪组织细胞核提取方法，简单易操作，得到的细胞核核膜完整、基因表达稳定，纯度高杂质少，可用于单细胞测序，具有良好的实际应用价值。
一种动物脂肪组织细胞核提取试剂盒及其制备方法应用

[发明专利]一种三维诱导干细胞成骨分化的方法-CN202310455398.7在审
发明人：杨祖;张花;王梽钰 -专利权人：苏州元生细胞生物科技有限公司
申请日： 2023-04-25 - 公布日： 2023-07-25 - 主分类号： C12N5/077 文献下载
摘要：本发明公开了一种三维诱导干细胞成骨分化的方法。所述方法包括：收集干细胞，制备成干细胞悬液，与多肽水凝胶工作液混合，接种于诱导培养基进行培养，进行诱导分化。本发明方法采用干细胞悬液与多肽水凝胶工作液共培养的方式诱导干细胞成骨分化，能够显著提高诱导效率，提高细胞贴壁率，降低细胞卷缩成团率，此外，明显缩短诱导时间，降低诱导成本，定向诱导成骨分化特异性强。
一种三维诱导干细胞分化方法

[发明专利]LOX1基因作为流体剪切力作用下BMSCs成骨分化促进剂的应用-CN202210290086.0有效
发明人：王现伟;张淑红;徐新慧;孙永琨;姚景柯;白晓源 -专利权人：新乡医学院
申请日： 2022-03-23 - 公布日： 2023-07-25 - 主分类号： C12N5/077 文献下载
摘要：本发明公开了LOX1基因作为流体剪切力作用下BMSCs成骨分化促进剂的应用，同时本发明设计了用于检测BMSCs中LOX1基因表达量的试剂盒。本发明首次证明了LOX1基因在骨髓间充质干细胞中的作用，且证明LOX1基因在流体剪切力作用下能够促进骨髓间充质干细胞的成骨分化，因此，LOX1基因可以用于制备流体剪切力作用下骨髓间充质干细胞成骨分化的促进剂，来加速骨髓间充质干细胞的成骨分化，从而克服细胞移植来源少的问题。
lox1 基因作为流体剪切力作 bmscs 分化促进剂应用

[发明专利]一种海绵体纤维化疾病模型建立方法-CN202210316290.5有效
发明人：韩厦;赵亮宇;李铮;姚晨成;纪智勇;罗嘉强;李朋;许俊伟;徐帅 -专利权人：上海市第一人民医院
申请日： 2022-03-29 - 公布日： 2023-07-25 - 主分类号： C12N5/077 文献下载
摘要：本发明涉及一种海绵体纤维化疾病模型建立方法，包括以下步骤：(1)海绵体内皮细胞的分离及XMU‑MP‑1处理；(2)细胞爬片免疫荧光染色；(3)海绵体组织体外培养及XMU‑MP‑1处理；(4)海绵体组织石蜡切片Masson染色；(5)大鼠在体海绵体XMU‑MP‑1处理，得到所需内皮‑间充质转化介导的海绵体纤维化大鼠模型。本发明填补了目前缺乏由于内皮‑间充质转化导致的海绵体纤维化模型的空白，极大地方便对于这一现象的体内、外实验的开展。本发明使用的XMU‑MP‑1针对海绵体成纤维细胞的Hippo通路进行激活，对其他导致海绵体纤维化的生物过程，如成纤维‑肌成纤维转化、成纤维细胞增殖等影响较小，具有靶点专一性。所以，针对内皮‑间充质转化这一生物过程，使用本发明造模可排除上述干扰。
一种海绵纤维化疾病模型建立方法

[发明专利]一种绿原酸-钙纳米缓释剂及在促进干细胞成骨分化中的应用-CN202210765621.3有效
发明人：王树萍;刘琦;张朔;周伟家;刘宏;孙春辉;任娜;王金刚 -专利权人：济南大学
申请日： 2022-07-01 - 公布日： 2023-07-25 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明公开了一种绿原酸‑钙纳米缓释剂及在促进干细胞成骨分化中的应用。该缓释剂的粒径为200‑300nm；在弱酸性环境中，可释放绿原酸分子和钙离子。将钙盐溶于双蒸水中得到钙盐溶液；将绿原酸溶于乙醇中得到绿原酸溶液；将绿原酸溶液滴加到钙盐溶液中得到混合液，调整混合液的pH值至9.0，加热并搅拌至产物不再析出，收集析出产物后依次进行洗涤、真空冷冻干燥，得到绿原酸‑钙纳米缓释剂。本发明的绿原酸‑钙纳米缓释剂可经胞吞进入细胞溶酶体后释放绿原酸和钙离子，可实现间充质干细胞定向分化，为干细胞定向分化提供了一种创新性的思路和方法，对开发基于干细胞疗法的骨缺损疾病的治疗具有重要临床应用价值和社会意义。
一种绿原酸纳米缓释剂促进干细胞分化中的应用

[发明专利]一种脐带间充质干细胞来源的外泌体的制备方法及应用-CN202310395080.4在审
发明人：刘启兵;吴昊霖;方星悦;吴昕泽;符兆理;徐怡倩;郭青云;易西南 -专利权人：海南医学院第一附属医院
申请日： 2023-04-13 - 公布日： 2023-07-21 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明属于生物类提取药领域，具体涉及一种脐带间充质干细胞来源的外泌体的制备方法及应用。本发明所述的脐带间充质干细胞来源的外泌体制备方法，运用Native‑Page凝胶技术，结合常规的电泳技术，实现了一体式分离外泌体的操作，外泌体的提取率可以提高一倍左右，并且可以大规模提取分离获得外泌体，不局限于微量的外泌体分离操作。经实验验证，采用本发明所述的方法分离获得的外泌体，对于氧糖剥夺模型所致的大鼠血管内皮细胞损伤具有显著的保护作用，同时对大鼠MCAO模型所致的脑缺血损伤也具有显著的保护作用。
一种脐带间充质干细胞来源外泌体制备方法应用

[发明专利]一种用于制备外泌体的脐带间充质干细胞的培养方法-CN202310228120.6在审
发明人：丰玫玫;邓智敏;杨宗繁;王利群;李健;王宁丁;曾胜 -专利权人：海南苏生生物科技有限公司
申请日： 2023-03-10 - 公布日： 2023-07-21 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于制备外泌体的脐带间充质干细胞的培养方法，包括以下步骤：(1)采集脐带组织，剥离出华通氏胶组织，洗涤后剪成组织小块，将组织小块转移至培养瓶中；(2)向培养瓶中缓慢加入培养基，在培养箱中培养，得到P0代细胞；(3)将P0代细胞用驯化激活培养基重悬，然后在培养箱中静置培养至细胞融合度达70％‑80％，得到P1代细胞；(4)重复步骤(3)，得到后代细胞。所述驯化激活培养基含有3‑(4－甲氧基苯氧基)‑1,2－丙二醇60～120μg/mL和丙酮酸乙酯12～17μg/mL。本发明可得到大量间充质干细胞，且经多次传代后干细胞仍保持较高的活性，细胞衰老缓慢。本发明培养所得的干细胞可分泌出大量外泌体，满足临床研究及应用的需求。
一种用于制备外泌体脐带间充质干细胞培养方法

[发明专利]一种鸡下颌骨支细胞的分离和培养方法-CN202310271392.4在审
发明人：陈继兰;石雷;孙研研;李云雷;袁经纬;麻慧 -专利权人：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
申请日： 2023-03-17 - 公布日： 2023-07-21 - 主分类号： C12N5/077 文献下载
摘要：本发明公开了一种鸡下颌骨支细胞的分离和培养方法，所述原代培养方法包含以下步骤：无菌条件取出胚胎期鸡下颌骨支，迅速放入含有1％三抗的PBS清洗，清洗后，将下颌骨支剪成1.5mm3大小，加入质量浓度0.25％的胰蛋白酶3ml，置于37℃水浴箱预消化20min；预消化结束加入等体积完全培养液终止消化，离心去上清后加入质量浓度为0.1％的I型胶原酶5ml，随后转入37℃水浴消化40min，离心去上清后，将组织块均匀平铺细胞培养皿底部，加入完全培养液，置于细胞培养箱中2～3天后观察，随后每隔2～3天更换一次培养液，培养5～7天即得到汇合度80％～90％的原代细胞；有益效果，本发明操作简单，获得的细胞量大、纯度高，能够后续稳定培养。
一种颌骨细胞分离培养方法

[发明专利]一种具有增强和延长的抗皮肤衰老效果的间充质干细胞条件培养基的制备方法-CN202310283802.7在审
发明人：孔樊龙;胡崇茂;刘思洋;刘永新 -专利权人：四川康世伦生物制药有限公司;康世伦（北京）再生医学生物科技有限公司
申请日： 2023-03-22 - 公布日： 2023-07-21 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明涉及抗皮肤衰老技术领域，尤其是涉及一种具有增强和延长的抗皮肤衰老效果的间充质干细胞条件培养基的制备方法，其利用经白消安诱导老化的造血干细胞与间充质干细胞的间接共培养，获得了能够同时对抗外源性衰老和内源性衰老从而提供增强和延长的抗皮肤衰老效果的间充质干细胞条件培养基。
一种具有增强延长皮肤衰老效果间充质干细胞条件培养基制备方法

[发明专利]促进细胞增殖的方法及包含细胞因子的化妆品或药物-CN202211038470.8有效
发明人：罗志平 -专利权人：广州瑞泓浩生物科技有限公司
申请日： 2022-08-29 - 公布日： 2023-07-21 - 主分类号： C12N5/077 文献下载
摘要：本发明属于细胞培养技术领域。更具体地，涉及促进成纤维细胞增殖的组合物、富含细胞因子的成纤维细胞提取物及其制备和在化妆品或药物中的用途。其中所述促进成纤维细胞增殖的组合物，包含氧化苦参碱。试验结果显示，浓度范围介于0.1～3μmol/L的氧化苦参碱对皮肤成纤维的增殖、合成Ⅰ型胶原蛋白及分泌TGF‑β1和bFGF具有明显的促进作用，细胞相对活率最高达到149.26％(空白组为100.00％)，培养上清中Ⅰ型胶原蛋白含量最高达到193.57μg/mL(空白组为72.36μg/mL。
促进细胞增殖方法包含细胞因子化妆品药物

[发明专利]一种黄鳍鲷肌肉组织细胞系及其应用-CN202210854172.X有效
发明人：魏世娜;秦启伟;李雪竹;罗维;徐穗锋;何小川 -专利权人：华南农业大学
申请日： 2022-07-20 - 公布日： 2023-07-21 - 主分类号： C12N5/077 文献下载
摘要：本发明公开了一种黄鳍鲷肌肉组织细胞系，命名为YSBM，该细胞系于2022年5月24日保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏登记入册编号为CCTCC NO：C2022122，请求保藏人为华南农业大学。该细胞系在低血清培养物中传代100次以上仍然可以正常生长，冻存后细胞复苏率90％以上，复苏细胞能够贴壁并生长分裂，并可以正常传代，细胞形态与增殖能力同冻存前无明显差异。该细胞系对神经坏死病毒(NNV)非常敏感，为深入研究NNV的感染与致病机理奠定了基础。
一种黄鳍鲷肌肉组织细胞系及其应用