本发明公开了一种花生同质型乙酰辅酶A羧化酶基因及其编码的蛋白质与克隆方法。所述基因序列由SEQ ID NO.1中从核苷酸第172-6954位的核苷酸序列所构成;所述基因编码的蛋白质具有序列表中SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列。本发明的花生同质型乙酰辅酶A羧化酶(AhACCase)基因的核苷酸序列及其编码的蛋白序列以及基因克隆方法,可广泛应用于花生品质的改良、花生的栽培和培养,尤其是花生作为油料作物的开发和利用等领域。
本发明公开了一种花生乙酰辅酶A羧化酶生物素羧化酶亚基基因及其编码的蛋白质与克隆方法。所述基因序列由SEQ ID No.1中从核苷酸第115-1737位的核苷酸序列构成;所述基因编码的蛋白质具有序列表中SEQ ID No.2所示的氨基酸序列。本发明公开的花生乙酰辅酶A羧化酶生物素羧化酶亚基(AhBC)基因的核苷酸序列及其编码的蛋白序列以及基因克隆方法,可广泛应用于花生品质的改良、花生的栽培和培养,尤其是花生作为油料作物的开发和利用等领域。
一种基因工程技术领域的生菜生育酚环化酶蛋白编码序列,具有SEQ ID NO.3中第6-1526位所示的核苷酸序列及其简并序列,该编码序列编码具有SEQ IDNO.4所示的氨基酸序列、或其保守性变异多肽、或其活性片段、或其活性衍生物;利用该编码序列提高植物维生素E含量的方法包括如下步骤:将生菜生育酚环化酶蛋白编码序列连接于植物表达调控序列上,得到含生菜生育酚环化酶蛋白编码序列的植物表达载体;将表达载体转入农杆菌,利用该农杆菌转化拟南芥;通过抗生素筛选,获得含有生菜生育酚环化酶蛋白编码序列的转化细胞,最终再生转基因植株及其后代。本发明可提高蔬菜中维生素E的含量,实现维生素E的大规模生产。
红曲菌乳清酸-5′-磷酸脱羧酶基因及其用途,属于微生物基因技术领域,本发明包括具有SEQ ID NO.1序列的红曲菌乳清酸-5′-磷酸脱羧酶基因,或与SEQ ID NO.1序列具有至少80%同源性的同系物,以及该基因或其同系物编码的氨基酸序列,在基因构建体中,其中基因或其同系物与一个或多个调节信号有效连接,本发明还包括该基因序列或其同系物在红曲菌中作为选择标记的用途,本发明通过基因工程手段,构建了遗传稳定、尿嘧啶营养缺陷型的红曲菌,该菌株不仅便于进行遗传转化和重组菌株的筛选,而且保持了野生型菌株的生理生化特性,有利于重组菌株的培养和外源蛋白的高效表达,具有较高的工业应用价值。
本发明涉及一种玉米C4型磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因及其在小麦生产中的应用。该基因为序列表中的SEQ ID No:1所示,基因克隆载体为pMD19-pepc,真核表达载体为p3301-pepc,宿主菌为E.coli感受态细胞DH5α,该羧化酶具有SEQ ID No:2所示的氨基酸序列。本发明通过将玉米C4型磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶导入小麦,对转基因植株的功能分析表明,转基因植株的净光合速率较未转化对照实现了大幅度提高,增幅最大的提高了1.39倍,为目前提高C3作物净光合速率幅度最大的一项研究。上述结果表明,本发明所涉及的玉米C4型高光效pepc基因可实现小麦等C3作物净光合速率的大幅度提高,将为小麦等C3农作物高光效转基因育种提供重要的技术与材料支撑。