本发明属于基因工程领域,具体地说是一种减毒肠毒素C2超抗原突变蛋白及其制备方法和应用。所述减毒肠毒素C2超抗原突变蛋白具有序列表SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:13或SEQ ID NO:15中碱基序列。以金黄色葡萄球菌DNA为模板,以引物对进行PCR扩增,然后以sec2-F和sec2-R为引物,以获得PCR产物为模板进行PCR扩增得到突变基因,将其克隆入pET-28a,构建减毒肠毒素C2突变蛋白的基因工程菌。本发明所述突变蛋白在保持一定超抗原活性的基础上,其催吐和致热活性较野生型肠毒素C2蛋白有显著的降低,达到了降低毒副作用的目的。
本发明提供具有金黄色葡萄球菌趋化抑制蛋白(‘CHIPS’)生物活性的多肽,该多肽包含SEQ ID NO:1的氨基酸序列的变体。优选地,该多肽为CHIPS变体,其中修饰了以下氨基酸中的一个或多个:N31、S32、G33、L34、P35、K40、D42、R46、Y48、K50、G52、T53、K54、N55、S56、A57、Q58、K61、E67、K69、L76、N77、P79、D83、L90、K92、K100、K101、S104、K105、S107、Y108、N111和G112。在一个优选实施方式中,该多肽在人体中相对于野生型CHIPS蛋白具有更低的免疫原性。本发明进一步提供制备及应用这些变体CHIPS多肽的方法。
本发明属于基因工程技术领域,涉及一种人工重组的六联体蛋白A以及其构建方法与用途。本发明所述的一种人工重组的六联体蛋白A,具有如序列表中SEQ ID NO.1所述的氨基酸序列。本发明所述的重组的蛋白A,其活性超过已经报道的重组蛋白A和天然蛋白A的水平,而且产量高、纯化工艺相对简单,避免了天然提取蛋白的致病菌的危险,又能大规模生产。