[发明专利]亚甲基丙二酸酯毫微细粒的制备方法及任选含有一种或多种生物活性分子的毫微细粒

说明书

本发明涉及一种制备由聚合的亚甲基丙二酸酯化合物形成的毫微细粒的新方法，任选地含有一种或多种生物活性分子的所述毫微细粒以及含有它们的药物组合物。

“毫微细粒”是指直径小于约500纳米的亚微米粒子。EP 0007895公开了由氰基丙烯酸烷基酯的乳液聚合形成的毫微细粒。制备这些氰基丙烯酸烷基酯粒子所用的方法是基于同时在水相中进行的单体的(阴离子)聚合。依照相同原理的、由亚甲基丙二酸酯聚合物构成的毫微细粒的制备过程尤其是被公开于Lescure等，Pharm.Res.,1994.11,1270-1276。其制备公开于EP 0283364中的这些单体的结构接近于氰基丙烯酸酯，但后者的腈官能团被酯或酯基酯代替。类似于氰基丙烯酸酯，它们也是在低温下在含水介质中聚合，并可生物降解。

然而，如此获得的亚甲基丙二酸酯毫微细粒有某些缺点。

实际上，呈毫微细粒形式的亚甲基丙二酸酯的乳液聚合，在水相并在略显酸性pH值下导致齐聚物，主要是三聚物或四聚物型齐聚物的形成，这些齐聚物是高度生物降解的。这些分子可部分地溶于水，因此这些毫微细粒在含水介质中的分散将导致它们的溶解，并导致迅速丧失粒子结构(P.Breton等，Eur.J.Pharm.Biopharm.,1996,42,95-103)。因此当一种生物活性分子与亚甲基丙二酸酯毫微细粒结合时，该分子可能会在给药后，视具体情况而定在达到活性组分起作用的位置之前、在导致形成粒子基质的齐聚物发生迅速溶解的循环液流稀释作用下被非常迅速地释放。

一些实验已经显示出，在碱性pH值下的聚合可形成高分子量的聚合物，同时保持毫微细粒的尺寸不变。然而，这些合成的特征在于：

-不可能得到Mw＜10000，更不必说是Mw＜8000的、构成单个毫微细粒的聚合物，而不形成聚集体并且无明显存在的齐聚物，

-在高pH值(pH＞7)下不可能形成Mw＞20000，更不必说是更高Mw的聚合物，而不形成聚集体，该聚集体使这些制剂无法进行血管内给药。

“Mw”是指质量平均分子量(或平均分子量)，定义作：Mw=∑ni.Mi²/∑ni.Mi,Mp是指数量上为主要物质的分子量。

在下文中，分子量是相对于等量聚苯乙烯(Ep)表示的。

因此该制备方法不适合于制备组成如下的聚亚甲基丙二酸酯毫微细粒：

-平均分子量约5000～10000，特别是约8000的聚合物，

-平均分子量大于20000而不形成聚集体的聚合物。

因此本发明涉及直径小于500nm，特别是100～500nm的亚甲基丙二酸酯毫微细粒的制备，该毫微细粒是由质量范围很宽(Mw约2000～80000)的均一分子形成的。其原理在于在水可混溶的质子惰性有机相中溶解单体，但是该质子惰性的有机相在毫微细粒的制备条件下与含水聚合介质形成一种对形成的聚合物为非溶剂的混合物。

“质子惰性的有机相”或“质子惰性的有机溶剂”，是指无不稳定的可引发阴离子的质子的有机相或溶剂。

本发明制备方法的优点是多方面的：

-它可使单体在聚合介质中分散得更均匀，

-它利用了一种非氯化的并且由于其挥发性而易于脱除的溶剂，

-它防止了聚合物聚集体的形成，

-它可使聚合产率提高，

-在形成直径小于500nm的毫微细粒中，它可形成分子量范围很宽(Mw为约2000～100000，特别是约2000～80000)的聚合物。

而且，该方法还可使用分散剂，如非离子表面活性剂或保护聚合物的胶体，这些分散剂可形成具有柔性表面性能的粒子。

最后，可以通过调节下述制备条件，精确地控制形成本发明的毫微细粒的齐聚物/聚合物的分子量：

-有机相中的单体浓度，

-聚合介质的pH值和摩尔浓度，

-分散剂的性质和浓度，

-水相(聚合介质)/有机相的体积比，

-在水相中引入有机混合物的方式。

因此第一方面，本发明涉及由至少一种通式(Ⅰ)的化合物的无规聚合物形成的毫微细粒的制备方法，(Ⅰ)其中

A表示基团或基团；

R₁和R₂相同或不同地表示一线性或支化的C₁～C₆烷基；n=1,2,3,4或5；其特征在于，单体(一种或多种)在聚合之前溶解在与水可混溶的质子惰性有机溶剂中，该有机溶剂与聚合介质形成对形成的聚合物是非溶剂的混合物。