[发明专利]EpothiloneC、D、E和F,其制备方法,以及作为细胞抑制剂和植物保护剂的应用

权利要求书

1、Epothilone，它们是如下得到的：

(a)在吸附树脂存在下以本领域已知的方式培养Sorangiumcellulosum DSM6773，

(b)从培养物中取出吸附树脂，并用水/甲醇混合物洗涤，

(c)用甲醇淋洗经洗涤的吸附树脂，然后浓缩洗脱液，得到粗提物，

(d)用乙酸乙酯提取上述得到的浓缩物，浓缩提取物，并在甲醇和己烷之间分配，

(e)浓缩甲醇相，得到残液，该浓缩物在Sephadex柱上进行分步提取，

(f)得到包含所用微生物之代谢产物的提取部分，

(g)在C18反相柱上用甲醇/水混合物对上述得到的部分进行色谱分离，并顺序得到：

-包含Epothilone A的第一部分，

-包含Epothilone B的第二部分，

-包含第一种其它Epothilone的第三部分，

-包含第二种其它Epothilone的第四部分；

然后分离

(h1)上述第三部分中的第一种其它Epothilone；和

(h2)上述第四部分中的第二种其它Epothilone。

2、经验式为C₂₆H₃₉NO₅S的Epothilone，其特征在于具有如表1所示的¹H-和¹³C-NMR光谱。

3、以下式的Epothilone C：Epothilone C:R=H。

4、经验式为C₂₇H₄₁NO₅S的Epothilone，其特征在于具有如表1所示的¹H-和¹³C-NMR光谱。

5、以下式的Epothilone D：Epothilone D:R=CH₃。

6、Epothilone A的生物转化体，其是如下得到的：

(a)在吸附树脂存在下按本领域已知的方式培养Sorangiumcellulosum DSM 6773，取出吸附树脂，如果需要，用Epothilone A的甲醇溶液处理全部或部分经分离的培养物；

(b)温育用Epothilone A处理的培养物，然后用吸附树脂处理；

(c)从培养物中分离吸附树脂，用甲醇淋洗，浓缩洗脱液，得到粗提物；

(d)在乙酸乙酯和水之间分配上述粗提物，分出乙酸乙酯相，并浓缩至油状；

(e)在以下条件对上述油状物进行反相色谱分离：

柱材料：Nucleosil 100C-18 7μm

柱尺寸：250×16mm

洗脱剂：甲醇/水=60∶40

流速：10ml/min

并分离出含有生物转化体的部分，该部分可在254nm处通过UV消光来检测，其R_t值为20min，然后分离所述生物转化体。

7、如权利要求6所述的Epothilone A生物转化体，其是在步骤(a)中培养物培养3或4或更多天时分离该培养物而得到的。

8、如权利要求6或7所述的Epothilone A生物转化体，其是在步骤(b)中进行温育1或2或更多天而得到的。