[发明专利]用渥曼青霉素及其类似物抑制磷脂酰肌醇3-激酶

说明书

本发明涉及抑制裂解的或完整的细胞中的磷脂酰肌醇3-激酶（PI3-激酶）的方法，它是通过将裂解的细胞或完整的细胞与一种称为渥曼青霉素（Wortmannin）的化合物或与某种渥曼青霉素类似物之一接触。这类化合物也能被用于选择性抑制哺乳动物，尤其是人体中的磷脂酰肌醇3-激酶，并用于治疗人体的磷脂酰肌醇3-激酶依赖性疾病，特别是人体肿瘤。

据信，肌醇磷脂的代谢是应答各种激素和生长因子的受体介导的信号传导途径中的必需组成部分[参见例如        Berridge，M.J.，etal.，Nature，312∶315-321（1984）;Nishizuka，Y.，Science，225∶1365-1370（1984）]。

在上述信号传导途径中，磷脂酰4，5-二磷酸经磷脂酶C水解生成1，4，5-三磷酸肌醇和甘油二脂这两种细胞内第二信使物质。1，4，5-三磷酸肌醇促进细胞内Ca²⁺库释放Ca²⁺，导致Ca²⁺/钙调素依赖性激酶的激活;甘油二酯则是激活蛋白激酶C。4，5-二磷酸磷脂酰肌醇在被裂解后，通过磷脂酰肌醇4-激酶和磷脂酰肌醇-4-磷酸激酶对磷脂酰肌醇的分步磷酸化作用又迅速重新合成了4，5-二磷酸磷脂酰肌醇。这两种激酶似乎在第二信使物质的产生过程中起着重要作用（参见，例如Duell，T.F.，US5，001，064（1991）;Shibasaki，F.，et    al.，J.Biol.Chem.266（13）∶8108-8114（1991）。

最近，已经证实存在着另外一种磷脂酰肌醇激酶，并且其存在与某些被激活的酪氨酸激酶相关[Courtneidge，S.A.，et    al.，Cell，50∶1031-1037（1987）;Kaplan，D.R.，et    al.，Cell，50∶1021-1029（1987）]。已发现这种鉴定为磷脂酰肌醇3-激酶的激酶对磷脂酰肌醇（PI）的肌醇环3位进行磷酸化形成3-磷酸磷脂酰肌醇（PI-3P）[Whitman，D.，etal.，Nature，332∶664-646（1988）]。

除了PI外，磷脂酰肌醇3-激酶也能够使4-磷酸磷脂酰肌醇和4，5-二磷酸磷脂酰肌醇磷酸化，分别产生3，4-二磷酸磷脂酰肌醇和3，4，5-三磷酸磷脂酰肌醇（PIP₃）[Auger，K.R.，et al.，Cell，57∶167-175（1989）]。

PI3-激酶与酪氨酸激酶[例如PP60^V-Src、多瘤中期T/PP60^V-Src、血小板衍生的生长因子受体、集落刺激因子-1受体和胰岛素受体（参见例如Shibasaki，同上文）]存在物理相关性，这表明PI3-激酶在信号传导及涉及与PI3-激酶相关性，这表明PI3-激酶在信号传导及涉及与PI3-激酶相关和激活PI3-激酶的蛋白质酪氨酸激酶的其它细胞过程中具有重要的但仍未确定的作用。也已在嗜中性粒细胞中鉴定了与嗜中性粒细胞和血小板中的G-蛋白受体相关的PI3-激酶活性[Traynor-Kaplan，A.E.，et al.，Nature，334∶353-356（1988）;Mitchell，C.A.，et al.，Proc.Nat.Acad.Sci.，87∶9396-9400（1990）]。然而，嗜中性粒细胞中发生的PI3-激酶的激活不依赖于酪氨酸的磷酸化[Vlahos，C.J.，et al.，FEBS Letters，309（3）∶242-248（1992）]。

PI3-激酶以85KDa调节亚单位和110KDa催化亚单位紧密相联的杂二聚体形式存在，并见于与几乎所有的配体-激活的生长因子受体和致癌基因蛋白质酪氨酸激酶的细胞复合体中[Cantley，L.C.，et    al.，Cell，64∶281-302（1991）]。85KDa调节亚单位在表观上充当一种使得PI3-激酶的110KDa催化亚单位与生长因子受体和酪氨酸磷酸化的蛋白质发生相互作用的接头蛋白[Margolis，C.，Cell    Groth    Differ.，3∶73-80（1992）]。