[其他]细胞分离器及其制作方法无效
申请号: | 87102643 | 申请日: | 1987-03-22 |
公开(公告)号: | CN87102643A | 公开(公告)日: | 1987-12-30 |
发明(设计)人: | 鹤纯明;森省一;小松纪子;藤井茂夫 | 申请(专利权)人: | 东亚燃料工业株式会社;旭光学工业株式会社 |
主分类号: | C12M1/12 | 分类号: | C12M1/12;C12N5/00 |
代理公司: | 中国专利代理有限公司 | 代理人: | 杨松坚 |
地址: | 日本东京*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 细胞 分离器 及其 制作方法 | ||
本发明涉及一种能由其它类型细胞中分离特定细胞的细胞分离器及其制作方法。
为了临床试验、免疫诊断及免疫治疗,常常要从含有各种类型之细胞混合物中分离某种特定类型的细胞。
然而,要从淋巴细胞中分离T细胞、B细胞、k细胞或Nk细胞时,至今尚未找到不改变细胞群体而分离出所要之细胞的方法。
日本专利公开204454(82)和140886(81)号公开了一种使用有机高分子化合物来分离和回收T细胞的方法,更具体地说,其中T细胞是使用一种颗粒状的、有酸性功能团如磺酸基、羧酸基、膦酸基及酚基团的乙烯、丙烯、氯乙烯、醋酸乙烯、苯乙烯、二乙烯苯、丙烯腈、甲基异丁烯酸的聚合物或共聚物分离的。然而,使用这种方法时,剩余的单体可对细胞产生细胞毒性作用。此外,由于颗粒的平均直径小,柱子便易于堵塞。
将交联的葡聚糖,即Sephadex 10(为Pharmacia公司之产品的商品名)用作细胞分离器的方法是已知的。在该方法中,大的和粘附的细胞如巨噬细胞和辅助细胞可被粘附到交联葡聚糖上而得以被分离,T细胞和B细胞则通过葡聚糖柱被洗脱。然而,这种方法中却是使T细胞粘附,而非粘附的辅助细胞则通过交联葡聚糖。因此,便不能得到完整的T细胞群体。
使用尼龙棉作细胞分离器的方法也是公知的富集T细胞的细胞分离方法。然而,用这种方法虽然可以得到比较高纯度的T细胞,但却改变了T细胞的细胞群体。此外,其分离能力和分离范型(图形)将随着尼龙棉的特定种类、散开尼龙棉的方式、装填尼龙棉的方法以及洗脱尼龙棉的方法的不同而改变。
因此,有必要提供一种能高选择性地、但不改变细胞群体的分离细胞的细胞分离器。
本发明的目的在于提供一种具有高选择性和重现性的、又不改变细胞群体的分离特定细胞的细胞分离器。
本发明的另一个目的是提供一种制作细胞分离器的方法。
本发明的再一个目的是提供一种分离细胞的装置,用这种装置可使细胞更易于分离,並且有高选择性和重现性。
本发明提供了一种包括含羟基磷灰石之纤维的纤维状细胞分离器。
可按本发明的方法制作纤维状细胞分离器,其包括:将含羟基磷灰石和粘合剂的水成悬液纺成纤维,並在一移动的表面上收集纤维以制得纤维状羟基磷灰石。
本发明还提供了一种分离细胞的装置,其包括一个柱子以及其中所装有的本发明之纤维状细胞分离器。
本发明的细胞分离器对于回收T细胞和去除免疫抑制细胞,例如抑制性T细胞是特别有效的。使用本发明之细胞分离器可高选择性地回收T细胞而不改变细胞群体。此外,由于本发明的细胞分离器可有效地粘附抑制性免疫细胞如抑制性T细胞,故该细胞分离器亦可用于免疫治疗。
图1图解说明了制备本发明之细胞分离器的方法。
图2显示用于本发明之细胞分离器的具体装置剖面示意图。
如上所述,本发明的细胞分离器包括含羟基磷灰石之纤维的纤维状材料。在纤维中羟基磷灰石的含量较好是占25%(重量),最好是占50%(重量)。由分离的选择性来看,构成纤维状材料的纤维最好主要由羟基磷灰石构成。然而应指出的是,如果纤维主要由羟基磷灰石组成,则其强度就会降低。为此,可在纤维内加入某种加固材料,如磷酸钙基化合物和水玻璃,以增加纤维的强度。所用加固材料中,优选的是磷酸钙基化合物,纤维中所用加固材料的量一般不超过25%(重量)。细胞分离器亦可含有水份。细胞分离器内之含水量一般为少于50%。优选的羟基磷灰石是Ca5(PO4)3(OH)。其中Ca/P之摩尔比为1.4至1.8。
构成本发明之细胞分离器的纤维之直径不受限制,但一般为1~100微米。本发明之纤维状细胞分离器的重量也不限,但一般是5克/米2~500克/米2。
本发明的纤维状细胞分离器可用一种特殊粘合剂经溶液纺丝之方法制成。所用粘合剂最好是水溶性的。为满足要求最好选用有机大分子材料。用作粘合剂最好选用含-OH、-COOH和-CONH2等功能团的水溶性线形大分子化合物。
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