[其他]一种具有抗血栓形成、溶解纤维蛋白、消炎活性的解聚的硫酸氨基己糖聚糖，其制备方法以及有关药品组合物

说明书

本发明涉及一种制备低聚糖类的方法，该法通过控制性化学解聚天然多糖类，如肝素、硫酸乙酰肝素、硫酸皮肤素、硫酸软骨素及透明质酸来实现。

本发明也涉及所生成的新产物以及和这些产物有关的药品组合物。

实际上，所得产物具有高的抑制凝血因子Xa的能力、高的抗血栓形成活性、高的溶解纤维蛋白活性以及消炎作用，基本没有抗凝剂效应。

这些产物口服后具有良好的生物利用率，这是由于寡聚物具有较之原料多糖降低了的分子量的缘故。

本发明的方法是：在10～20%水溶液中，在30℃至70℃之间的温度下，并在有适量的金属催化剂如Cu²⁺、Fe²⁺、Cr³⁺或Cr₂O^3-₇等存在下，其浓度为0.001至0.1M，通过由过氧化物或过酸，如过乙酸、过氧化氢、3-氯-过苯甲酸、过硫酸钠、枯基过氧氢引发的自由基反应将多糖解聚。解聚产物通常是通过加入溶剂或季铵碱类使发生沉淀而以固体形式从反应溶液中分离出来。

生成的低聚糖类通常与碱金属，如钠、钾或锂或与碱土金属如钙或镁形成盐类。

3500至8000道尔顿的低分子量肝素具有显著的抗血栓形成的活性，但基本没有抗凝剂效应。

此外，曾报导过用高碘酸降解（Tollefsen    DM.Nouv.Rev.Fr.Haematol.26.233.1984），并经亲和层析获得的含有最少为12-14个糖基的硫酸皮肤素片段对肝素解辅因子Ⅱ具有显著活性，此活性高于未分解的硫酸皮肤素。另一方面，其他硫酸软骨素和硫酸肝素的降解产物都不是已知的。

以往已报道了解聚天然肝素的许多方法，一种适于制得低分子量化合物的方法是：在稀硝酸中对肝素进行脱氨水解。生成的化合物的特点是具有一个由2，5-脱水甘露糖（Ⅰ）构成的末端：

R＝H，SO₃H

（美国专利No.4438261;1982年10月28日出版的WO/82/03627;欧洲专利申请No.0048231）。

还有一种对肝素（欧洲专利申请No.0040144）或对烷基肝素或芳基酯类（欧洲专利申请No.0044228）进行碱性水解的方法，该法藉助于β-消除产生具有平均分子量为2000-9000道尔顿的低聚物，这些低聚物以不饱和糖（Ⅱ）作为末端基团：

R′＝H，SO₃H

R＝COOH

上述方法的产率非常低

另一种解聚方法是在非常稀的溶液中并以非常低的产率用肝素酶对肝素进行酶催化水解，形成糖（Ⅲ）和半缩醛形式的氨基葡糖（Ⅳ）作为末端基团（欧洲专利申请No.0064452;J.Biol.Chem.257.7310，1982）。

基于使用氧化剂如碱性过碘酸盐类的一些肝素解聚方法也公开了，这些方法是用该氧化剂把非硫基化糖醛酸的邻近的C₂-C₃羟基之间的键氧化，从而使葡苷键不稳定（见Casu B.“肝素的结构和生物活性”，Advances in Carbohyar.Chem.Biochem.Vol.43.1985.51-134，Acad.Press）。

其他一些方法是基于在高温（125℃）和压力下过氧化氢和酸性pH对肝素的共同作用。由解聚而得到的寡聚物有活性变化和活性损失。（1984年8月22日公布的欧洲专利申请No.0101141）

其他一些方法是基于用硫酸进行酸解聚以及用氯磺酸的混合物同时或随后再硫酸化（Nagasawa    K.等，Arhiv.Biochem.Biophys，150，451，1972;法国专利申请No.2538404）。

所有这些实验室规模的方法，都有产率低、重现性不好的问题，扩大到半工业和工业规模时尤其如此。

意大利专利申请No.40021A/83（相应于欧洲专利申请No.0121067），叙述了一种方法，该法同时使用过氧化氢、抗坏血酸和醋酸铜以得到合适分子量的低聚糖类。

上述发明考虑了大大延长反应时间，即长达24-48小时，以及采用高度稀释的肝素溶液，随之而来的是产率低。此外，解聚的产物被抗坏血酸降解产物所污染。