[发明专利]L-氨基酸连接酶的制备方法及其在二肽合成上的应用有效
| 申请号： | 202310894436.9 | 申请日： | 2023-07-20 |
| 公开（公告）号： | CN116622795B | 公开（公告）日： | 2023-10-13 |
| 发明（设计）人： | 洪浩;詹姆斯·盖吉;张娜;焦学成;马玉磊;张海彬;齐奕珂;马天娇 | 申请（专利权）人： | 凯莱英生命科学技术（天津）有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/00 | 分类号： | C12N9/00;C12P21/02;C07K5/06;C12N15/70 |
| 代理公司： | 北京康信知识产权代理有限责任公司 11240 | 代理人： | 路秀丽 |
| 地址： | 300457 天津市滨*** | 国省代码： | 天津;12 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 氨基酸 连接酶 制备 方法 及其 二肽 合成 应用 | ||
1.一种制备二肽的方法，其特征在于，所述方法包括利用如SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列的L-氨基酸连接酶进行二肽合成反应，得到所述二肽。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述二肽合成反应的底物为氨基酸。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述氨基酸选自甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、丝氨酸、苏氨酸、半胱氨酸、甲硫氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、天冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸、精氨酸、组氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、脯氨酸或酪氨酸中的一种或两种。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述二肽包括Gly-Gln、Gly-Tyr、Gly-Gly或Ala-Gln。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述二肽合成反应的反应体系包括：pH值为8.5-9.0的如下缓冲液：0.1-0.2M Tris-HCl、0.1-0.2M ATP及0.1-0.2M MgCl2。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述二肽合成反应的反应温度为20-25℃。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述二肽合成反应的反应时间为15-17h。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，进行所述二肽合成反应的所述L-氨基酸连接酶在反应体系中的质量浓度为0.05-1mg/mL。
9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，进行所述二肽合成反应的底物在反应体系中的浓度为10-200 mM。
10.一种L-氨基酸连接酶的制备方法，其特征在于， 将编码SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列的L-氨基酸连接酶的基因克隆至表达载体中，得到重组载体；
将所述重组载体导入宿主细胞中，得到重组菌株；
培养所述重组菌株，诱导所述L-氨基酸连接酶的表达，得到培养液；
将所述培养液进行超声破碎后离心，得到所述L-氨基酸连接酶。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于凯莱英生命科学技术（天津）有限公司，未经凯莱英生命科学技术（天津）有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/202310894436.9/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：功率变换器及其斜坡信号产生器及斜坡信号产生方法
- 下一篇：AGV连接器
