[发明专利]应用于流式细胞术检测T细胞表面CD39分子的检测方法

说明书

本发明公开了可应用于流式细胞术检测T细胞表面CD39分子的抗体组合物，该抗体组合物是由均为单克隆抗体的抗CD45抗体、抗CD3抗体、抗CD4抗体、抗CD8抗体和抗CD39抗体按照1:1:1:1:2的体积比混合的混合物。可为后续临床的治疗提供完整精准的个体信息，从而实现个体化精准化的治疗。

技术领域

本发明涉及流式检测技术领域，具体涉及可应用于流式细胞术检测 T 细胞表面CD39 分子的抗体组合物。

背景技术

免疫系统是机体执行免疫应答及免疫功能的重要系统，具有监视、防御和调控的作用。免疫系统不仅能够识别外来入侵的病原体，同时也能够识别和清除体内发生突变的肿瘤细胞、衰老细胞等其他有害成分。正常情况下发生突变的肿瘤细胞都会被机体的免疫系统识别并且清除，但是肿瘤患者体内的肿瘤细胞由于肿瘤微环境的复杂性，使其逃脱了机体的免疫监视，进而发生发展甚至转移。如何使机体有效识别肿瘤细胞并对其进行清除是肿瘤治疗的核心问题之一。机体的免疫系统由多种成分构成，包括免疫器官、免疫细胞和免疫分子。淋巴细胞作为主要的免疫细胞，在免疫系统发挥功能的过程中起重要作用。淋巴细胞简单的我们可以划分为CD3阳性T细胞，B淋巴细胞和NK细胞，其中CD3阳性T细胞又可以分为CD4阳性T细胞和CD8阳性T细胞。再往下细分我们又可以将CD4阳性T细胞分为辅助性T细胞，记忆型T细胞，调节性T细胞等等。此外巨噬细胞、DC细胞和MDSC细胞也是免疫细胞的重要成员，协助免疫系统发挥功能。肿瘤免疫微环境是一个非常复杂的内环境，不仅包括肿瘤细胞，免疫细胞，内皮细胞等其他细胞，还包括各种细胞因子和基质成分。通过流式细胞术检测肿瘤患者外周血中CD3阳性T细胞，CD4阳性T细胞，CD8阳性T细胞，B淋巴细胞和NK细胞来评估肿瘤患者的一个免疫功能状态，从而为临床提供有用的信息。T淋巴细胞介导的细胞免疫是机体主动的免疫应答，T淋巴细胞具有多种生物学功能，如直接杀伤靶细胞、辅助B细胞产生抗体以及产生细胞因子等。而CD8阳性T细胞是细胞毒性T细胞，能够直接杀伤靶细胞。细胞毒性T细胞作为机体免疫系统杀伤肿瘤细胞的主要执行者，只有这类淋巴细胞基数达到一定数量时，机体的免疫系统才有可能去杀伤肿瘤细胞；而如果这类细胞的数量基数都很低，机体的免疫系统就无法去杀伤肿瘤细胞，从而影响后续的治疗包括一些免疫单抗治疗，如PD-1，CTLA-4等。外周血淋巴细胞亚群虽然不能够准确反应肿瘤原位中淋巴细胞亚群的状态，但是外周血样本取材方便，检测准确的特点，同时同一患者外周血和肿瘤原位淋巴细胞亚群变化具有一致性，使得外周血淋巴细胞亚群分析成为目前最为可行的评估肿瘤患者免疫状态。

肿瘤免疫学研究表明，癌症的发生、发展与机体的免疫状态密切相关。其中T淋巴细胞是细胞免疫的主要应答形式，在机体抗肿瘤免疫中起主导作用，能够识别和清除肿瘤细胞。代谢组学和免疫学一直是医学生物学的前沿领域。已有文献报道在肿瘤免疫微环境中腺苷是一个较为重要的免疫抑制分子，它能够促进调节性T细胞的生成，同时影响免疫微环境中的其他免疫细胞，从而促进肿瘤细胞的逃逸。而CD39作为腺苷代谢途径中的起始分子，在腺苷产生过程中发挥着重要作用。

随着靶向治疗等新疗法的不断出现，使癌症有了可治愈的希望，目前治疗方法除传统的化疗及靶向药物外，免疫治疗已成为新的发展方向。多种免疫检查点抗体药物的临床应用为癌症的临床治疗提供了新的方案，也为肿瘤患者带去了福音。而CD39分子作为腺苷代谢途径中的关键分子，具备了成为一种新型免疫检查点的潜力。

流式细胞术（Flow Cytometry，FCM）是一种能够对单个细胞实现定量分析的检测手段，具有快速、高精度、多参数等优点，是目前最先进的细胞定量分析方法之一。FCM在临床及科研领域都发挥着重要作用，特别在临床体外诊断已有非常广泛和深入的应用，成为最主流的检测手段之一。

利用FCM对人体外周血T细胞表面分子CD39，使用特定的抗体组合物，配合多色流式细胞仪，可以有效检测其表达水平。然而，抗体组合物的正确选择是实现上述目的的关键所在。

发明内容

鉴于现有技术中的上述缺陷或不足，期望提供抗体组合物及其在检测T细胞表面分子CD39表达水平的应用。