[发明专利]应用于流式细胞术检测T细胞表面CD39分子的检测方法有效
| 申请号： | 202310855489.X | 申请日： | 2023-07-13 |
| 公开（公告）号： | CN116593699B | 公开（公告）日： | 2023-10-03 |
| 发明（设计）人： | 金昊;唐露;赵阔;韩冬梅 | 申请（专利权）人： | 天津市肿瘤医院空港医院 |
| 主分类号： | G01N33/569 | 分类号： | G01N33/569;G01N15/14;G01N33/577 |
| 代理公司： | 天津市鸿图专利代理事务所(普通合伙) 12254 | 代理人： | 王艳华 |
| 地址： | 300450 天津*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 应用于 细胞 检测 表面 cd39 分子 方法 | ||
1.可应用于流式细胞术检测 T 细胞表面 CD39 分子的抗体组合物，其特征是，该抗体组合物是由均为单克隆抗体的抗CD45抗体、抗CD3抗体、抗CD4抗体、抗CD8抗体和抗CD39抗体按照1:1:1:1:2的体积比混合的混合物。
2.根据权利要求1所述的可应用于流式细胞术检测 T 细胞表面 CD39 分子的抗体组合物，其特征是，各抗体均为荧光素标记的抗体；抗CD45抗体、抗CD3抗体、抗CD4抗体、抗CD8抗体、抗CD39抗体，抗体的荧光素标记按顺序分别为：FITC、PE、PerCP-Cy5.5、PE-Cy7、APC。
3.根据权利要求1所述的可应用于流式细胞术检测 T 细胞表面 CD39 分子的抗体组合物，其特征是，运用该抗体组合物检测T细胞表面CD39分子的过程包括以下步骤：
（1）将待测样本加入到流式管中，使呈单个细胞悬液状态，并保证 细胞量1×106/管-1×107/管；所述待测样本为外周血或组织单细胞悬液；
（2）将步骤（1）处理得到的样本，流式管中加入所述的抗体组合物中的抗体，混匀后 室温避光孵育；
（3）向步骤（2）孵育后的流式管中加入1×溶血素，室温避光孵育；
（4）向步骤（3）孵育后的流式管中加入PBS缓冲液洗涤，离心后去上清，用PBS缓冲液重悬细胞；
（5）对步骤（4）重悬细胞进行流式细胞上机检测，样本选择CD45、CD3、CD4、CD8抗体分别组合SSC设门，筛选CD3+CD4+辅助型T细胞和CD3+CD8+杀伤型T细胞，进行CD39分子表达水平分析。
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