[发明专利]一种塔宾曲霉及其在制备单宁酶和/或降解单宁中的应用

说明书

本发明提供了一种塔宾曲霉及其在制备单宁酶和/或降解单宁中的应用，涉及单宁降解技术领域。本发明将塔宾曲霉TPDA‑1的活菌体、死菌体和发酵清液中的至少一种用于制备菌剂，且塔宾曲霉TPDA‑1应用于制备单宁酶和/或降解单宁中；为单宁酶的生产开发提供了新的路径，有效解决了单宁酶产量低、生物降解单宁无法工业化生产等问题。

技术领域

本发明属于单宁降解技术领域，具体涉及一种塔宾曲霉及其在制备单宁酶和/或降解单宁中的应用。

背景技术

单宁是广泛存在于植物体内的多酚类化合物，在植物酚类物质中，其含量仅次于木质素，多出现于营养价值极高的饲用树木、灌木、豆科植物和谷物中。单宁是一种典型抗营养因子，其会破坏并阻碍营养物质的消化利用，尤其是对单胃和水产动物。目前其利用一般以小分子形式如鞣花酸、儿茶素、花青素及其衍生物为主，因此，通过降解单宁，获得低分子量单宁是提高单宁利用率和单宁精细化利用的重要途径。单宁的降解主要有化学降解和生物降解，其中化学降解效率高但易污染环境不易工业化，而生物降解主要利用关键限制性酶单宁酶实现对单宁的降解，降解具有专一性且绿色无污染，但是目前生物降解采用的商品酶活性为200U/g左右，价格昂贵，限制了其在工业中的应用。

单宁酶是可水解单宁的酯键与缩酚羧键生成葡萄糖和没食子酸的一类酶总称。单宁酶的来源较为匮乏，受到野生菌株本身单宁酶产量低、酶活低、酶解机制复杂的限制。单宁酶性质差异主要由单宁酶基因来源与培养条件决定，来源于酵母和曲霉菌属的单宁酶特性均属于糖蛋白，而来源于细菌中的单宁酶则不存在翻译后修饰。目前生物降解单宁还无法有效的实现工业化生产。因此，开发能够产生单宁酶进而降解单宁的微生物菌种是目前亟待解决的问题。

发明内容

针对现有技术中存在的上述问题，本发明提供一种塔宾曲霉及其在制备单宁酶和/或降解单宁中的应用，将塔宾曲霉 TPDA-1用于制备单宁酶和/或降解单宁中，为单宁酶的生产开发提供了新的路径，有效解决了单宁酶产量低、生物降解单宁无法工业化生产等问题。

为实现上述目的，本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：提供一种塔宾曲霉（ Aspergillus tubingensis），命名为塔宾曲霉 TPDA-1（ Aspergillus tubingensisTPDA-1），于2023年03月23日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏地址为广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，保藏编号为GDMCC No：63289。

进一步，塔宾曲霉的ITS核苷酸序列如SEQ ID No:1所示。

一种菌剂，包括上述的塔宾曲霉。

进一步，塔宾曲霉为活菌体、死菌体和发酵清液中的至少一种。

进一步，发酵清液通过以下方法制备得到：将塔宾曲霉进行发酵培养，固液分离，得发酵清液。

进一步，发酵培养时，接种量为1×10⁵-1×10⁶CFU/mL，转速为100-120rpm，温度为30-39℃，时间为72-96h。

进一步，在12000rpm和0-20℃条件下固液分离20min。

本发明提供的塔宾曲霉经过培育能够产生大量的塔宾曲霉活菌体，本发明对培养方法没有特别的限制，只要通过该培养方法可以使所述塔宾曲霉大量增殖即可，例如，可以将塔宾曲霉在平板培养基中培养至产孢，利用生理盐水洗脱孢子并充分振荡、稀释后获得孢子悬浮液，孢子液可以4℃冰箱下保存备用，或者直接接种至发酵培养基中进行发酵培养。

上述塔宾曲霉在制备单宁酶和/或降解单宁中的应用。

一种降解单宁的方法，包括以下步骤：