[发明专利]角豆果荚天然小分子化合物DEMOTT的分离提取并鉴定及其应用

说明书

本发明涉及一种从角豆果荚中分离到新的天然小分子化合物的分离提取方法及应用。通过核磁数据和分子量测定阐明化学结构。角豆果荚天然小分子化合物DEMOTT有助于提高免疫力和有助于抗氧化。

技术领域

本发明涉及微生物领域，具体涉及一种新角豆果荚天然小分子化合物，具有提高免疫力、抗氧化功效的小分子化合物DEMOTT。

背景技术

现代免疫学认为，免疫力是人体识别和排除“异己”的生理反应。它能通过人体免疫系统识别人体内正常与不正常的微生物和细胞，并通过免疫应答排除内外致病微生物和细胞，从而维持机体正常运行。免疫力下降会导致身体各个细胞和器官之间的平衡破坏，致病病毒和细菌侵入人体，致机体生病。因此开发提高免疫力的产品具有重要意义。

氧化应激(Oxidative Stress，OS)是指体内氧化与抗氧化作用失衡的一种状态，倾向于氧化，导致中性粒细胞炎性浸润，蛋白酶分泌增加，产生大量氧化中间产物。氧化应激是由自由基在体内产生的一种负面作用，并被认为是导致衰老和疾病的一个重要因素。事实上，人体几乎所有的器官都很容易受到氧化应激带来的伤害，症状表现不计其数，如疲倦、全身无力、肌肉和关节痛、消化不良、焦虑、抑郁、皮肤瘙痒、头痛，以及注意力难以集中和感染难以痊愈等。由氧化应激水平升高诱发的最常见疾病有心脏病、癌症、骨关节炎、风湿性关节炎、糖尿病以及神经退化性问题如阿尔兹海默症、帕金森病。因此开发抗氧化功能产品具有重要意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种角豆果荚天然小分子化合物的制备方法，本发明另一目的在于提供该角豆果荚天然小分子化合物的应用。

具体地，本发明从角豆果荚中分离提纯得到的小分子化合物DEMOTT，具有良好的提高免疫力和抗氧化功效。

本发明所述角豆果荚天然小分子化合物DEMOTT的化学式为C₂₆H₂₈O₁₆

本发明所述角豆果荚天然小分子化合物DEMOTT的结构如下：

本发明以LC-MS/MS为导向对角豆树果荚中的天然小分子成分进行系统分离、波谱解析和结构鉴别；

本发明以角豆树果荚为原材料分离提取得到；具体步骤如下：

本发明采用醇提法，将提取液浓缩制得浸膏；用水分散浸膏，进行树脂吸附、洗脱；依次使用石油醚和乙酸乙酯分别萃取洗脱液；

本发明所述天然小分子DEMOTT是由角豆树果荚分离提纯得到的；

本发明采用硅胶柱色谱、ODS色谱柱、SephadexLH-20和半制备液相等色谱方法逐级进行分离纯化角豆果荚得到的。

以上所述方法中，硅胶柱色谱优先采用200～300硅胶柱；优先采用洗脱程序为先采用石油醚-乙酸乙酯(1:1→0:1)梯度洗脱，再用二氯甲烷-甲醇(7:1→0:1)梯度洗脱。

以上所述方法中，ODS色谱柱优先采用ODS(40～63μm)；优先采用流动相为甲醇-水溶液。

以上所述方法中，SephadexLH-20色谱柱洗脱液采用二氯甲烷-甲醇按45～55:55～45体积比洗脱，优先采用50:50。

以上所述方法中，半制备液相分离先采用250×20mm的YMC-PackODS-A色谱柱进行分离，再采用250×10mm的YMC-Pack ODS-A色谱柱进行分离。

本发明将得到的单体进行核磁数据(¹HNMR、¹³CNMR)和分子量的测定。

在本发明一些实施例中，所述角豆树果荚为豆科长豆角属植物角豆树(拉丁学名：CeratoniasiliquaLinn.)干燥的果荚。