[发明专利]一种前列腺癌类器官的培养基体系及培养方法

权利要求书

1.一种前列腺癌类器官的培养基体系，其特征在于，所述培养基体系包括成球培养基和分化培养基；

所述成球培养基包括Advanced DMEM/F12基础培养基、B27、L-谷氨酰胺、R-Spondin-1重组蛋白、Noggin蛋白、FGF basic、FGF-10、EGF、ROCK抑制剂Y-27632、A83-01、p38MAPK抑制剂SB202190、烟酰胺、肝细胞生长因子、Wnt 3a细胞因子、硫酸酯酶2重组蛋白；

所述分化培养基包括所述成球培养基和分化培养添加剂；所述分化培养基添加剂包括氯化锌和亚精胺。

2.根据权利要求1所述一种前列腺癌类器官的培养基体系，其特征在于，所述成球培养基还包括双氢睾酮和PGE2。

3.根据权利要求2所述一种前列腺癌类器官的培养基体系，其特征在于，所述成球培养基还包括pH缓冲液、抗菌剂和抗氧化剂；所述pH缓冲液为HEPES，所述抗菌剂为Primocin抗生素，所述氧化剂为N-乙酰半胱氨酸。

4.根据权利要求3所述一种前列腺癌类器官的培养基体系，其特征在于，所述成球培养基中，HEPES的浓度为5-10mM、B27的浓度为1×、L-谷氨酰胺的浓度为1×、R-Spondin-1重组蛋白的浓度为100-200ng/ml、Noggin蛋白的浓度为50-100ng/ml、FGF basic的浓度为1-2ng/ml、FGF-10的浓度为10-20ng/ml、EGF的浓度为50-100ng/ml、ROCK抑制剂Y-27632的浓度为10-20μM、A83-01的浓度为0.5-2μM、双氢睾酮的浓度为1-2nM、Primocin抗生素的浓度为50-100μg/ml、p38MAPK抑制剂SB202190的浓度为10-20μM、烟酰胺的浓度为10-20mM、N-乙酰半胱氨酸的浓度为1-2mM、PGE2的浓度为1-2μM、Wnt 3a细胞因子的浓度为10-20ng/ml、肝细胞生长因子的浓度为50-100ng/ml、硫酸酯酶2重组蛋白的浓度为5-10ng/ml；溶剂为Advanced DMEM/F12基础培养基。

5.根据权利要求4所述一种前列腺癌类器官的培养基体系，其特征在于，HEPES的浓度为10mM、R-Spondin-1重组蛋白的浓度为125ng/ml、Noggin蛋白的浓度为100ng/ml、FGFbasic的浓度为1ng/ml、FGF-10的浓度为20ng/ml、EGF的浓度为50ng/ml、ROCK抑制剂Y-27632的浓度为10μM、A83-01的浓度为0.5μM、双氢睾酮的浓度为1nM、Primocin抗生素为100μg/ml、p38MAPK抑制剂SB202190的浓度为10μM、烟酰胺的浓度为10mM、N-乙酰半胱氨酸的浓度为1.25mM、PGE2的浓度为1μM、Wnt 3a细胞因子的浓度为10ng/ml、肝细胞生长因子的浓度为50ng/ml、硫酸酯酶2重组蛋白的浓度为5ng/ml；溶剂为Advanced DMEM/F12基础培养基。

6.根据权利要求4所述一种前列腺癌类器官的培养基体系，其特征在于，所述分化培养基中，氯化锌的浓度为10-20mg/L，亚精胺的浓度为5-10mM。

7.根据权利要求4所述一种前列腺癌类器官的培养基体系，其特征在于，所述分化培养基中，氯化锌的浓度为10mg/L，亚精胺的浓度为5mM。

8.一种前列腺癌类器官的培养方法，其特征在于，采用如权利要求1～7任意一项所述的培养基体系进行培养；其中，先在所述成球培养基中对病灶组织样本进行培养，再向培养液中添加所述分化培养基继续培养。