[发明专利]一种快速鉴定小麦对假禾谷镰刀菌茎基腐病抗性的方法

权利要求书

1.一种快速鉴定小麦对假禾谷镰刀菌Fusarium pseudograminearum茎基腐病抗性的方法，其特征在于，所述快速鉴定方法包括以下步骤：

a、小麦种子催芽：将小麦种子采用灭菌蒸馏水进行冲洗，冲洗后放入H₂O₂溶液中进行催芽，催芽后采用灭菌蒸馏水冲洗；

b、小麦幼苗培养：将步骤a催芽冲洗后所得小麦种子置于培养皿中，将培养皿放入培养箱中进行培养，培养时间为6天；

c、小麦假禾谷镰刀菌Fusarium pseudograminearum孢子悬浮液制作：将4℃冰箱保存备用的假禾谷镰刀菌Fusarium pseudograminearum单孢菌切成0.3cm²的块状，接种于羧甲基纤维素钠CMC培养基中进行培养，培养时间为5～7天，培养后采用纱布过滤，得到孢子悬浮液；

所述假禾谷镰刀菌Fusarium pseudograminearum单孢菌的菌株名为WZ-8A；

d、接菌鉴定：将步骤c所得Fusarium pseudograminearum孢子悬浮液中加入甲基纤维素后进行摇匀，摇匀后喷洒在步骤b中培养后的小麦幼苗茎基部，然后用透明塑料罩罩上保湿，接着置于培养箱中进行培养，25℃条件下继续培养10天；

e、鉴定结果记录：接菌培养第10天，记录步骤d中小麦幼苗茎基腐病的病级，病级记录值分为0、1、3、5、7、9共五级；

f、病情指数DI计算：利用公式DI＝∑[(各病级的株数×各病级记录值)/(总株数×9)]×100进行计算病情指数；

g、茎基腐病抗性评价：根据步骤f计算的病情指数评价小麦对假禾谷镰刀菌Fusariumpseudograminearum茎基腐病的抗性。

2.根据权利要求1所述的快速鉴定小麦对假禾谷镰刀菌Fusarium pseudograminearum茎基腐病抗性的方法，其特征在于，步骤a中小麦种子放入H₂O₂溶液中进行催芽的具体过程为：将体积百分含量为0.5％的H₂O₂溶液置于培养皿中、每皿10mL，然后将冲洗后的小麦种子放入H₂O₂溶液中进行催芽，在25℃、黑暗条件下，催芽1天。

3.根据权利要求1所述的快速鉴定小麦对假禾谷镰刀菌Fusarium pseudograminearum茎基腐病抗性的方法，其特征在于，步骤b中小麦幼苗培养的具体过程：

1)、将步骤a经催芽后发育一致的小麦种子放于直径9cm的培养皿中，培养皿中预先加2层灭菌滤纸和4mL的灭菌蒸馏水，每个培养皿放置3个小麦品系，每品系10粒；

2)、将放好种子的培养皿置于25℃培养箱中暗培养2天，然后在每个培养皿中补充10mL灭菌蒸馏水，将培养皿的盖子去掉；

3)、2天后，培养箱的温光周期为“25℃、光照、11小时”与“21℃、黑暗、13小时”交替进行，再继续培养4～5天至小麦幼苗一叶一心。

4.根据权利要求1所述的快速鉴定小麦对假禾谷镰刀菌Fusarium pseudograminearum茎基腐病抗性的方法，其特征在于，步骤c中所述羧甲基纤维素钠CMC培养基的配制方法为：

1)、首先在2L烧杯中加入15g CMC，然后加热至60～70℃条件下搅拌至CMC溶解成透明状；

2)、接着加入1g硝酸铵、1g磷酸二氢钾、0.5g七水硫酸镁和1g酵母抽提物，搅拌均匀；

3)、最后用蒸馏水定容至1L，分装到3个1L三角瓶中，用封口膜密封，然后在121℃条件下灭菌30min，晾凉备用。

5.根据权利要求1所述的快速鉴定小麦对假禾谷镰刀菌Fusarium pseudograminearum茎基腐病抗性的方法，其特征在于，步骤c中所述接种于羧甲基纤维素钠CMC培养基中进行培养时的条件为：置于可控温摇床中，在25℃、150转/分钟的条件下，震荡培养5～7天，培养基中充满孢子。