[发明专利]一种Y-STR荧光标记复合扩增检测体系及其应用

说明书

本发明公开Y‑STR荧光标记复合扩增检测体系及其应用，复合扩增检测体系包括10个多拷贝Y‑STR基因座、16个单拷贝Y‑STR基因座、3个Y‑indel遗传标记和3个内部质量参考，以及对应的33个引物对，每个引物对均携带荧光染料标记物。上述Y‑STR荧光标记复合扩增检测体系可用于男性家系精细化排查。本发明能够在案件检材初步检验的基础上，增加尽可能多的Y‑STR基因座，使最终获得的分型能够达到公安部刑侦局推荐的Y‑STR核心和优选基因座的要求，全面满足Y‑STR入库比对及后期检验排查的要求；该体系将可应用于男性家系排查中的精细化识别，为侦查办案提供技术支撑。

技术领域

本发明涉及Y-STR遗传标记技术领域。具体地说是一种Y-STR荧光标记复合扩增检测体系及其应用。

背景技术

Y-STR遗传标记是目前法庭科学领域检验鉴定的有效手段，是常染色体STR及线粒体遗传标记等的重要补充。由于Y染色体为男性个体所特有，其上绝大部分(95％以上)为非重组区，Y-STR呈现父系遗传的特点，在父系遗传关系鉴定和混合斑男性个体检验等方面发挥着重要作用。同时，利用Y-STR在一个家系中相对保守的特点，可对重点地区的家系进行Y-STR分型检验，开展家系排查，从而辅助侦查人员快速锁定嫌疑人所在家系，加快案件的进程。近年来，Y-STR技术已帮助破获了大量命案积案。

然而在实际应用中发现，单一的Y-STR试剂盒时常不能有效区分不同的男性家系，或者同一家系的男性近亲。为将嫌疑人排查范围进一步缩小，需增加大量Y-STR基因座，以获得更多侦查线索。近年来，随着Y-STR技术的发展，国内外Y-STR相关的扩增检验体系不断完善，试剂产品也不断丰富。主流Y-STR检验试剂盒基本都包含了公安部刑侦局推荐的DNA数据库选用的20个核心和15个优选Y-STR基因座。其他补充试剂盒则从以下3个方面进行基因座的选择，以弥补排查中系统分辨效能的不足:一是快速突变Y-STR基因座，该类基因座突变率高(高于1×10^-2)，对无关男性个体及男性近亲均拥有更高的分辨能力；二是多拷贝Y-STR基因座，它们往往具有更高的基因多样性，也有助于提升系统分辨能力；三是公安部刑侦局推荐DNA数据库选用的备选基因座，可进一步提升系统效能。通过多个Y-STR检验试剂盒联用，大大增加了Y-STR分型数据，可以在一定程度上解决上述问题。

但试剂盒数量增加意味着对案件检材量的要求也更高。一些案件的现场检材提取DNA，在当地公安机关开展前期检验工作后，仅剩余不到10μL,一旦DNA模板浓度低，每次扩增，反应体系中必然需要加入更多的模板，这就意味着现场检材的量仅能满足1个或者最多2个试剂盒的扩增反应，最终研究人员获得的Y-STR分型将受到这些试剂盒的局限，影响后期的排查效果。

发明内容

为此，本发明所要解决的技术问题在于提供一种Y-STR荧光标记复合扩增检测体系及其应用,以解决现有Y-STR检验试剂盒对案件检材量要求高等问题，满足案件排查的广泛需求，尤其是现场检材量十分有限的情况。

为解决上述技术问题，本发明提供如下技术方案：

一种Y-STR荧光标记复合扩增检测体系，包括10个多拷贝Y-STR基因座、16个单拷贝Y-STR基因座、3个Y-indel遗传标记和3个内部质量参考，以及对应的33个引物对，每个引物对均携带荧光染料标记物。

上述Y-STR荧光标记复合扩增检测体系，10个多拷贝Y-STR基因座分别为DYF371、DYF383S1、DYF399S1、DYF403S1、DYF404S1、DYF409S1、DYF411S1、DYS464、DYS526和DYS527；DYF403S1包含DYF403S1a、DYF403S1b1和DYF403S1b2，DYS526包含DYS526a和DYS526b；