[发明专利]一种三螺旋结构三文鱼核酸及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种三螺旋结构三文鱼核酸及其制备方法和应用，属于生物材料工程技术领域。制备方法包括如下步骤：（1）取三文鱼核酸与超纯水制备三文鱼核酸溶液；（2）取尿囊素、谷胱甘肽、左旋肉碱、氯化钠、氨甲环酸、五水合硫酸铜，加入到超纯水中制备结构调节液；（3）将三文鱼核酸溶液与结构调节液低温混合，制备低温混合液；（4）将低温混合液置于温控设备中，进行梯度温度程序处理，得到三螺旋结构三文鱼核酸溶液；（5）取梯度温度程序处理后的溶液，加入乙醇，过滤得到三螺旋结构三文鱼核酸。本发明采用结构调节液和梯度温度程序处理制得的三螺旋结构三文鱼核酸，解决了传统单链或双链螺旋结构三文鱼核酸填充能力弱等问题。

技术领域

本发明属于生物材料工程技术领域，特别涉及一种三螺旋结构三文鱼核酸及其制备方法和应用。

背景技术

三文鱼为一种常见海水冷水鱼类，其成年雄鱼的鱼精中含有纯度高的核酸。采用工业化手段以三文鱼鱼精为原料制取三文鱼核酸，这是一项成熟的工程技术，采用常规的提取技术制备的三文鱼核酸为双螺旋结构，或者由于提取条件的原因，造成部分双螺旋结构解体成为单链核酸结构。

核酸的天然结构为双螺旋结构。在自然条件下，会在某种尚不明确的生理条件下，在双螺旋结构中间，点缀有短片段的三螺旋结构，该种三螺旋结构的形成机制为，双螺旋结构的一条链较长，翻身折叠以参与形成为三链螺旋结构；在自然条件下，该种三螺旋结构极少见，而采取目前的工程提取技术无法得到三螺旋结构的核酸。

天然生物大分子可能有单链、双链或三链结构，不同的结构有不同的功能，在自然选择的过程中，分别发挥着不同的生物学作用。

发明人在研究过程中发现，在自然状态下得到的三螺旋结构的三文鱼核酸，其数量极少，结构不稳定且无法大量获取，然而通过现有提取技术提取到的三文鱼核酸为双螺旋或单链结构，在应用于医疗美容方面时面临着填充能力较弱、在体内维持时间短、容易被体内的酶降解、失去大分子支持作用等的问题，其美容填充应用价值有限，而三螺旋结构三文鱼核酸具有的生物学优势在医疗美容领域具有极大的价值。因此，亟需一种可以稳定大量提取三螺旋结构三文鱼核酸继而有效提高其作为填充剂的填充能力的制备方法。

发明内容

为解决以上技术问题，本发明的目的在于提供一种三螺旋结构三文鱼核酸及其制备方法和应用，通过采用结构调节液和梯度温度程序处理，结合乙醇沉淀，在保持三文鱼核酸的核苷酸顺序的基础上，优化其二级结构，得到大量结构稳定且填充效果优异的三螺旋结构的三文鱼核酸，以解决传统技术提取到的三文鱼核酸为单链或双链结构以及其作为填充剂填充效果差等问题。

为实现上述目的，本发明所采用的技术方案如下：

一种三螺旋结构三文鱼核酸的制备方法，包括如下步骤：

（1）制备三文鱼核酸溶液

取三文鱼核酸，加入超纯水，搅拌至完全溶解，得到三文鱼核酸溶液，置于低温下保存备用；

（2）制备结构调节液

取尿囊素、谷胱甘肽、左旋肉碱、氯化钠、氨甲环酸、五水合硫酸铜，加入到超纯水中，搅拌至完全溶解，得到结构调节液，置于低温下保存备用；

（3）制备低温混合液

将三文鱼核酸溶液和结构调节液在低温下混合，得到低温混合液，保持低温静置；

（4）梯度温度程序处理

将低温混合液置于温控设备中，进行梯度温度程序处理，得到三螺旋结构三文鱼核酸溶液；

（5）乙醇沉淀

取（4）中梯度温度程序处理后的溶液，加入乙醇，搅拌至充分混合，过滤得到的沉淀，即为三螺旋结构三文鱼核酸。

三文鱼核酸的完整基因组序列可在基因序列数据库（GenBank）中查询。