[发明专利]一种乳制品中植物源性成分的检测方法在审
| 申请号: | 202310304965.9 | 申请日: | 2023-03-27 |
| 公开(公告)号: | CN116287408A | 公开(公告)日: | 2023-06-23 |
| 发明(设计)人: | 杨洁;吕雅馨;赵仲凯;孙国栋 | 申请(专利权)人: | 新疆大学 |
| 主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司: | 北京鼎佳达知识产权代理事务所(普通合伙) 11348 | 代理人: | 刘铁生;孟阿妮 |
| 地址: | 830017 新疆维吾尔自治区乌*** | 国省代码: | 新疆;65 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 乳制品 植物 成分 检测 方法 | ||
1.一种乳制品中植物源性成分的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)提取乳制品的DNA;
(2)进行PCR扩增;
(3)进行电泳检测。
2.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,
所述的乳制品为鲜乳、巴氏杀菌乳、高温灭菌乳以及乳粉。
3.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,
所述的步骤(2)中,植物体系PCR反应体系为:0.5ng/μL的DNA模板2μL,2xTaqMasterMixⅡ10μL,10μM的正向引物0.5μL,10μM的反向引物0.5μL,无DNA酶RNA酶水7μL,总体积20μL。
4.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,
所述的步骤(2)中,植物体系PCR反应程序为:
5.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,
所述的步骤(2)中,PCR扩增中植物源通用引物的核苷酸序列为F:5’-CGAAATCGGTAGACGCTACG-3’、R:5’-CCTGAAGTAAGAACCAGAT G-3’。
6.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,
所述的步骤(3)中,电泳检测为琼脂糖凝胶电泳或毛细管电泳。
7.根据权利要求6所述的检测方法,其特征在于,
所述的琼脂糖凝胶电泳中,植物体系的PCR扩增子用3%琼脂糖凝胶电泳还原。
8.根据权利要求7所述的检测方法,其特征在于,
所述的琼脂糖凝胶电泳中,电泳条件90V,60min,用凝胶成像仪成像,曝光时间0.2s。
9.根据权利要求6所述的检测方法,其特征在于,
所述的毛细管电泳过程中,对于每个PCR扩增产物用Dilution Buffer作10倍稀释后进行毛细管电泳。
10.根据权利要求9所述的检测方法,其特征在于,
所述的毛细管电泳过程中,采用高分辨率运行方法,样品注入时间10s,分离电压4kV,分离时间800s。
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