[发明专利]一种由SCN5A突变基因导致病态窦房结综合征的双点突变基因型检测试剂盒

说明书

本发明公开了一种由SCN5A突变基因导致病态窦房结综合征的双点突变基因型检测试剂盒，属于生物技术和临床医学检测技术领域。本发明基于病态窦房结综合征患者携带SCN5A复合杂合突变[c.2893CT(p.R965C)and c.2431CT(p.R811C)]的发现，以及，采用微孔板电化学发光检测技术，提出双点突变基因型检测试剂盒，为病态窦房结综合征的检测提供理论参考。

技术领域

本发明涉及一种检测试剂盒，尤其涉及一种由SCN5A突变基因导致病态窦房结综合征的双点突变基因型检测试剂盒，属于生物技术和临床医学检测技术领域。

背景技术

病态窦房结综合征是由于窦房结及其邻近组织的病变引起窦房结起搏功能和传导功能障碍，从而产生心律失常、血流动力学障碍和心功能受损等一系列临床症状的疾病。病态窦房结综合征可发生于任何一个年龄段，但是老年人群较为常见。其中，儿童型病态窦房结综合征发病率较低，且早期可无症状，但是随着年龄的增长等，会出现心功能不全、心脏停搏或猝死等严重并发症，因此对于病态窦房结综合征的早期诊断，有助于对患儿进行及时的医疗干预，可明显改善患儿的预后。

病态窦房结综合征可分为原发性、继发性和特发性，其中特发性与遗传因素密切相关。

SCN5A基因编码心脏钠离子通道α亚基，是维持心肌细胞正常兴奋性的关键蛋白。

发明内容

发明人团队在病态窦房结综合征家系样本的全外显子组测序中发现，病态窦房结综合征患者携带了一个罕见的SCN5A复合杂合突变[c.2893CT (p. R965C) and c.2431CT (p. R811C)]，而对应的健康父母各携带其中一个杂合突变。以上发现说明该复合杂合突变是导致病态窦房结综合征发病的主要因素。

基于此，本发明基于微孔板电化学发光检测技术构建检测试剂盒，并在单个孔里实现两个位点的基因型检测。

为了实现上述技术目的，提出如下的技术方案：

一种由SCN5A突变基因导致病态窦房结综合征的双点突变基因型检测试剂盒，包括：检测由SCN5A突变基因导致病态窦房结综合征的各个基因位点的野生型序列的特异性寡核苷酸、突变型序列的特异性寡核苷酸和分别识别各个基因位点的通用寡核苷酸；

其中，SCN5A突变基因的突变位点分别为：c.2893CT（p. R965C）和 c.2431CT（p.R811C）；

c.2893CT（p.R965C）突变位点的野生型序列的特异性寡核苷酸为：5’-TAGTTAAGCCGGCCCCTCTGGATGCG-3’；c.2893CT（p.R965C）突变位点的突变型序列的特异性寡核苷酸为：5’-GTACAATCTGCGGCCCCTCTGGATGCA-3’；c.2893CT（p.R965C）位点的通用寡核苷酸为：p-5’- GGCCAGGGCCAGCTGGAGGT-botin-3’；

c.2431CT（p.R811C）突变位点的野生型序列的特异性寡核苷酸为：5’-ACCTATACCCGGTACCAGGCG-3’；c.2431CT（p.R811C）突变位点的突变型序列的特异性寡核苷酸为：5’-GGATAACAAGGTACCAGGCA-3’；c.2431CT（p.R811C）位点的通用寡核苷酸为：p-5’-GAAGGAGCGCAGCACCGACA-botin-3’。

进一步的，所述野生型序列的特异性寡核苷酸、突变型序列的特异性寡核苷酸和通用寡核苷酸的终浓度均为0.1-0.5μM。