[发明专利]一种基于核磁共振技术的鱼胶品种和等级的鉴定方法

权利要求书

1.一种基于核磁共振技术的鱼胶品种和等级的鉴定方法，其特征在于包括以下步骤：

1)收集样本：收集不同品种的鱼胶样本，所有样品收集后室温保存；

2)样本酶解：用磷酸缓冲液、胰蛋白酶和碱性蛋白酶的混合液对鱼胶样本进行酶解；

3)核磁共振谱测定：对每一个鱼胶样本进行核磁共振检测，采集得到原始图谱；

4)处理分析原始谱图：对原始谱图预处理得到二维的积分数据，进行数据分析得到特征峰的归属，根据不同品种鱼胶的核磁共振特征峰和差异代谢物，计算出鱼胶各项成分含量的参数阈值，从而建立鱼胶成分含量阈值数据库；

5)设计鱼胶品种鉴别、等级鉴定系统：利用鱼胶成分含量阈值数据库统一标准设置成分和含量指标阈值，使用MATLAB程序软件设计鱼胶品种鉴别、等级鉴定系统，直接处理Excel格式的二维积分数据矩阵从而用于鉴别鱼胶的品种、等级的食品组学分析，通过新的鱼胶样品数据验证系统的准确性。

2.如权利要求1所述一种基于核磁共振技术的鱼胶品种和等级的鉴定方法，其特征在于在步骤2)中，所述样本酶解的具体步骤为：鱼胶先经过液氮速冻然后经打粉机打成粉末或者块状，取100mg的鱼胶、15mg的胰蛋白酶、48mg的碱性蛋白酶和3mL的超纯水，在55℃下水浴加热4h进行鱼胶的酶解；水浴后冷却至室温，用10,000g转速在4℃下离心10min，取300μL上清液，加入300μL缓冲液，缓冲液含0.05％TSP，将溶液震荡至均匀后用10,000g转速在4℃下离心10min，取出500μL移入5mm核磁管，封口，放入277K冰箱中，静置12h等待实验。

3.如权利要求1所述一种基于核磁共振技术的鱼胶品种和等级的鉴定方法，其特征在于在步骤3)中，所述核磁共振谱测定的具体步骤为：在装备有超低温探头的布鲁克600MHz的核磁共振谱仪上完成，脉冲序列，zg30；扫描叠加次数，64次；弛豫延迟，4s；单次采集时间，1.93s；采集点数，32K；谱宽，6613.8Hz；实验环境通过谱仪控制在298K；所有样本选择zg30序列进行检测，采集鱼胶的高分辨率一维核磁共振氢谱。

4.如权利要求1所述一种基于核磁共振技术的鱼胶品种和等级的鉴定方法，其特征在于在步骤4)中，所述处理分析原始谱图的具体步骤为：采集得到的鱼胶样本原始谱图使用MestReNova软件进行预处理，对预处理后的谱图进行分段积分和全谱归一化后得到每行为分析样本，每列为微小成分信息的二维矩阵，最后对谱峰进行物质归属；叠加特征峰所在积分区间的积分值，通过鱼胶的相对定量结果确定阈值；所述预处理包括傅立叶变化，加上1Hz窗函数以提高信噪比，相位调整，基线校正，定标等预处理。

5.如权利要求1所述一种基于核磁共振技术的鱼胶品种和等级的鉴定方法，其特征在于在步骤5)中，所述设计鱼胶品种鉴别、等级鉴定系统的逻辑为：基于MATLAB软件编译完成的，直接读取MestRenova导出的积分数据信息，然后根据之前筛选的特征代谢物和特征峰所对应的化学位移计算其积分面积，再和之前的数据进行对比分析从而对鱼胶的品种和等级进行分类；最后基于这些原理使用MATLAB进行代码的撰写，代码也主要分为三个部分，分别是主界面的代码和实现品种鉴别和等级鉴定的代码，最后再通过MATLAB中的图形用户界面功能进行界面化；利用设计的鉴定系统鉴定鱼胶品种和等级的准确率达到92.6％和90.0％。