[发明专利]一种含有MDR1-siRNA和阿霉素的载药系统

权利要求书

1.一种含有MDR1-siRNA和阿霉素(DOX)的载药系统，其特征在于，由抗肿瘤治疗药物DOX、逆转肿瘤多药耐药的MDR1-siRNA、靶向分子西妥昔单抗(Cex)和人血清白蛋白(HSA)制备而成。

2.权利要求1所述的载药系统，其特征在于，其中所述靶向递送载体Cex-HSA/DOX/siMDR1由以下组分制备而成：Cex、HSA、DOX、MDR1-siRNA。

3.权利要求2所述的载药系统，其特征在于，该系统的制备方法如下：去溶剂法制备共载阿霉素(DOX)和siMDR1的白蛋白纳米粒，在巯基化的白蛋白纳米粒表面修饰Cex。

4.权利要求1所述的载药系统，其特征在于，为纳米结构。

5.权利要求1所述的载药系统的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)制备共载阿霉素(DOX)和siMDR1的白蛋白纳米粒HSA/DOX/siMDR1，方法如下：将HSA、盐酸阿霉素、siMDR1溶于NaCl溶液中，缓慢滴加无水乙醇，得到白蛋白纳米粒，用戊二醛固定；

2)制备西妥昔单抗修饰的白蛋白纳米粒Cex-HSA/DOX/siMDR1，方法如下：用NHS-PEG3500-MAL对制备好的纳米粒进行巯基化，用2-亚氨基硫烷盐酸盐对西妥昔单抗进行硫醇化，将巯基化的纳米粒与硫醇化的西妥昔单抗常温混合搅拌，得到Cex-HSA/DOX/siMDR1。

6.权利要求5所述的制备方法，其中所述制备共载阿霉素(DOX)和MDR1siRNA的白蛋白纳米粒HSA/DOX/siMDR1，方法如下：

(1)室温条件下，将20mg HSA固体，2mg盐酸阿霉素和16mg MDR1-siRNA加入到1mL，10mMNaCl溶液中，调节pH＝9，以600rpm转速在恒温磁力搅拌器上搅拌15min，

(2)将4mL无水乙醇以1.5mL/min的速度滴加到上述溶液中，待乙醇加完后，持续搅拌混合溶液3h形成白蛋白纳米粒，

(3)用移液枪吸取5μL，50％的戊二醛溶液滴加到HSA纳米粒中，继续搅拌24h，固定纳米粒，

(4)在4℃，9000g条件下，离心30min，弃去上清液，用10mM NaCl溶液溶解沉淀物，重复操作3次，得到纳米粒HSA/DOX/siMDR1。

7.权利要求5所述的制备方法，其特征在于，其中所述制备西妥昔单抗修饰的白蛋白纳米粒Cex-HSA/DOX/siMDR1的方法，步骤如下：

(1)精密称取44mg NHS-PEG3500-MAL偶联剂固体，加入500μL磷酸盐缓冲液，调其pH＝8.0，

(2)精密量取制备好的纳米粒溶液500.0μL于茄形瓶中，加入100μL NHS-PEG3500-MAL偶联剂溶液。在20℃恒温磁力搅拌器上搅拌1h，

(3)取1.0mL西妥昔单抗缓冲液(浓度为1mg/mL，pH＝8.0)，向其中加入40.2mL的2-亚氨基硫烷盐酸盐(2-iminothiolane)缓冲液，在20℃恒温磁力搅拌器上搅拌1h。

(4)移液枪吸取500.0μL巯基化的白蛋白纳米粒加入到500.0μL硫醇化之后的西妥昔单抗缓冲液中，在20℃恒温磁力搅拌器上搅拌1h，在高速离心机上进行离心分离，得到产物Cex-HSA/DOX/siMDR1。