[发明专利]一种小肽在制备治疗骨关节炎药物中的应用

说明书

本发明公开了一种小肽在制备环氧化酶‑2抑制剂和治疗骨关节炎药物中的用途，该小肽来源于龟板，其氨基酸序列为N‑Q‑G‑X‑B，该小肽为首次从中药龟板中分离鉴定，为充分利用龟板药材提供了新途径，同时也为相关药物的开发提供了新资源。

本申请是下列专利申请的分案申请：

原申请的申请日：2021年11月26日

申请号：202111422918.1

发明创造名称：一种小肽在制备治疗骨关节炎药物中的应用

技术领域

本发明属于制药领域，具体涉及一种小肽在治疗骨关节炎中的应用。

背景技术

骨关节炎是一种慢性退行性疾病，包括关节软骨丧失、软骨下骨硬化、骨赘和低度滑膜炎、半月板及髌骨下脂肪垫损伤。严重者可发生关节畸形，行动障碍。现代医学多采用消炎镇痛药进行治疗，如非甾体抗炎药和弱阿片类药物。然而，由于这些药物只能缓解不同症状的疼痛，但不能有效阻止关节软骨退变，长期用药治疗不利于远期身体健康，非甾体抗炎药存在潜在的心血管和消化道出血风险，加之患者抗拒药物治疗，从而导致疗效不佳，严重影响人们日常正常活动需求。为此，亟需探索预防、延缓甚至逆转骨关节炎的发病，寻找安全有效的保护剂或者天然制剂。

龟板是我国一种传统中药，具有滋阴潜阳、强肝肾、抗癌、防癌，对阴虚潮热、骨蒸劳热、心烦意乱、高血压、脑中风等症具有较好的预防和治疗作用。有研究表明一些龟提取物具有良好抗高血压和抗菌作用。从石金钱龟中提取的蛋白质和肽已在动物实验中被证明具有抗氧化和免疫系统增强作用。然而，龟板肽对于抗炎及其作用机制研究较少，对于骨关节炎是否存在影响尚不清楚。但有研究发现，龟甲胶能延缓关节软骨细胞的退变，延缓骨关节炎的病理进程。还有研究发现，龟板肽分子是治疗骨病的有效成分，能够治疗骨质疏松。但龟板肽是否对关节炎有效仍未被证实。

本发明通过提取龟板肽，然后对龟板肽中的肽段组成和功能进行大量分析和验证，最终得到一种对骨关节炎具有较好治疗作用的小肽。

发明内容

本发明的目的是提供一种小肽在制备治疗骨关节炎药物中的用途。

上述目的是通过以下技术方案实现的：

申请人首先从中药龟板中提取分离生物活性肽，接着通过液质联用、质谱解析、序列比对、分子对接和体外酶活抑制实验等大量试验从中筛选出具有较强COX-2酶抑制活性的小肽，其氨基酸序列为N-Q-G-X-B(SEQ ID No.1)或K-N-G-P(SEQ ID No.2)或W-G-X-B(SEQ ID No.3)。该小肽为首次从中药龟板中分离鉴定，为充分利用龟板药材提供了新途径，同时也为相关药物的开发提供了新资源。

上述小肽既可以从龟板中提取分离，也能使用本领域所熟知的人工方法合成。当使用提取分离方法进行制备时，需要从提取得到的多肽中分离目标肽段，所述目标肽段的分离可使用本领域所熟知的色谱法等，例如使用半制备或制备液相色谱进行分离，在已明确目标肽段分子结构的基础上，本领域技术人员在使用这些分离方法时无需克服技术障碍。

当使用人工合成方法进行制备时，该小肽由于分子量小，因此还具有合成工艺简单、周期短、成本低廉等优势。

体内动物实验结果表明：本发明提供的小肽对大鼠体重没有显著影响，说明小肽不会对大鼠正常生长造成损害。但是该小肽能明显改善膝关节软骨缺损及表面状态，说明对骨关节损伤具有治疗作用；通过对血清中CTX-Ⅱ、COMP和关节液TNF-α含量分析，发现该小肽能缓解骨关节炎症状，延缓关节软骨的降解和退变，且作用温和，副作用小。

综上，本发明提供的小肽既能在体外发挥对COX-2酶的抑制活性，又能在体内发挥对骨关节炎的治疗作用，从而能应用于制备COX-2抑制剂或治疗骨关节炎药物，具有广泛的应用前景。

附图说明