[发明专利]一种快速检测人干扰素活性的方法在审
| 申请号: | 202310243586.3 | 申请日: | 2023-03-14 |
| 公开(公告)号: | CN116590424A | 公开(公告)日: | 2023-08-15 |
| 发明(设计)人: | 曹领改;张孝廉;余世洲;贾蒙骜;刘杰;张吉顺;张盼 | 申请(专利权)人: | 贵州省烟草科学研究院 |
| 主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司: | 贵州博创知识产权代理事务所(普通合伙) 52122 | 代理人: | 刘艳 |
| 地址: | 550081 贵州*** | 国省代码: | 贵州;52 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 快速 检测 干扰素 活性 方法 | ||
1.一种快速检测人干扰素活性的方法,其特征在于:包含以下步骤:(1)植物源人干扰素的获得;(2)细胞培养及加药处理;(3)RNA提取;(4)RNA反转录cDNA;(5)Real-Time PCR:利用qPCR试剂盒检测基因MX1、ISG15、IFITM3、APOBEC1的表达量变化。
2.根据权利要求1所述的一种快速检测人干扰素活性的方法,其特征在于:所述的细胞培养及加药处理为:(1)K562细胞和Jurkat细胞的复苏;(2)K562细胞和Jurkat细胞的传代:以1:4进行细胞传代,加入新鲜配制的含FBS的DMEM培养基,混匀,在含CO2的细胞培养箱继续培养;(3)加药处理:将植物源重组人干扰素分别加入到K562、Jurkat细胞中,检测对应组MX1、ISG15、IFITM3、APOBEC1基因表达。
3.根据权利要求1所述的一种快速检测人干扰素活性的方法,其特征在于:所述qPCR反应中引物如下:
。
4.根据权利要求1所述的一种快速检测人干扰素活性的方法,其特征在于:
所述qPCR的反应条件:
5.根据权利要求1或2所述的一种快速检测人干扰素活性的方法,其特征在于:所述的植物源重组人干扰素为IFN-α1b、IFN-α2b。
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