[发明专利]一种口腔用骨填充物的制备方法

说明书

本发明涉及骨填充物技术领域，具体为一种口腔用骨填充物的制备方法。包括以下步骤：(1)原料的选择：a.重组胶原蛋白；b.无机材料：多孔双相磷酸钙陶瓷；(2)溶解胶原：将重组胶原蛋白加入蒸馏水中，溶解，得到重组胶原蛋白溶液；(3)配置EDC溶液，配置NHS溶液；(4)将重组胶原溶液使用NaOH溶液调节pH＝5.5±2，缓慢滴加EDC溶液，边滴加边搅拌；接着滴加NHS溶液，边滴加边搅拌，得到混合溶液；(5)将混合溶液放入恒温摇床中，预交联，取出，得到预交联溶液；(6)称取多孔双相磷酸钙陶瓷加入到预交联溶液中，继续放入恒温摇床中，交联，取出，过滤出固体颗粒；(7)将固体颗粒冷冻干燥，得到骨填充物。

技术领域

本发明涉及骨填充物技术领域，具体为一种口腔用骨填充物的制备方法。

背景技术

天然生物材料(动物胶原蛋白)具有良好生物相容性，越来越多的研究者将动物胶原蛋白应用到骨修复领域中。但动物胶原蛋白也存在一些问题，如提取过程无法消除疯牛病等病毒隐患。此外，人胶原在提取过程中也无法消除艾滋病等传染危险。并且，动物胶原蛋白水溶性差，在溶于酸和碱的过程中，容易产生细胞毒性。综上，动物源型和人源型胶原蛋白存在的这些问题让其在骨修复等领域中的应用受到限制。而重组胶原蛋白是在人胶原蛋白基因的基础上，通过基因工程技术生产的高分子生物蛋白，具有生物相容性好、易溶于水、细胞毒性低、排异反应低、细胞黏附性好等优点。因此，重组胶原蛋白可以作为传统骨修复材料中动物胶原的替代物质。

现有技术中，胶原蛋白骨修复材料大多呈块状，虽然具有较好的机械强度，但可塑性较差，无法适用各种骨损伤部位或不规则骨缺损部位的修复。此外，目前报道的胶原蛋白骨修复材料大多通过共混法、共沉淀法制备；存在无机材料(羟基磷灰石/β-磷酸三钙)易团聚，分布不均，与胶原界面结合欠佳等缺陷。

综上，解决上述问题，制备一种口腔用骨填充物，使其能够具有更好的生物活性和不同的临床应用途径具有重要价值。

发明内容

本发明的目的在于提供一种口腔用骨填充物的制备方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为了解决上述技术问题，本发明提供如下技术方案：

一种口腔用骨填充物的制备方法，包括以下步骤：

(1)原料的选择：a.重组胶原蛋白；b.无机材料：多孔双相磷酸钙陶瓷；

(2)溶解胶原：将重组胶原加入蒸馏水中，溶解，得到重组胶原溶液；

(3)配置交联剂：将碳二亚胺盐酸盐加入蒸馏水中，溶解，得到EDC溶液；将N-羟基琥珀酰亚胺加入蒸馏水中，溶解，得到NHS溶液；

(4)将重组胶原溶液使用NaOH溶液调节pH＝5.5±2，缓慢滴加EDC溶液，边滴加边搅拌；接着滴加NHS溶液，边滴加边搅拌，得到混合溶液；

(5)将混合溶液放入恒温摇床中，预交联，取出，得到预交联溶液；

(6)称取多孔双相磷酸钙陶瓷加入到预交联溶液中，继续放入恒温摇床中，交联，取出，过滤出固体颗粒；

(7)将固体颗粒冷冻干燥，得到骨填充物。

较为优化地，步骤(2)中，所述重组胶原溶液的浓度为80～300mg/mL。

较为优化地，步骤(3)中，所述EDC溶液的浓度为50～200mg/mL；NHS溶液的浓度为20～100mg/mL。

较为优化地，步骤(4)中，EDC溶液占混合溶液的0.05～1wt％；NHS溶液占混合溶液的0.01～1wt％。

较为优化地，步骤(5)中，预交联过程中，温度调至30～40℃，震荡频率调至100～220rpm，预交联30～50分钟；步骤(6)中，交联过程中，温度调至30～40℃，震荡频率调至100～220rpm，交联时间为3～4小时。