[发明专利]一种小麦籽粒半薄切片的制备方法在审

专利信息
申请号: 202310191580.6 申请日: 2023-03-02
公开(公告)号: CN116481873A 公开(公告)日: 2023-07-25
发明(设计)人: 郑雪娇;杨宝林;王媛花 申请(专利权)人: 江苏农林职业技术学院
主分类号: G01N1/28 分类号: G01N1/28;G01N1/30;G01N1/36
代理公司: 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 代理人: 柏尚春
地址: 212400 江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 小麦 籽粒 切片 制备 方法
【权利要求书】:

1.一种小麦籽粒半薄切片的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:

(1)取样:采用冰刀片切取小麦颖果中部的样块;

(2)固定:采用FAA固定液进行固定,FAA固定液的组成为:70%乙醇:冰醋酸:福尔马林的体积比=18:1:1;

(3)洗涤;

(4)脱水:采用不同浓度的乙醇进行逐级脱水;

(5)渗透:采用JB-4I渗透液和无水乙醇进行逐级渗透;

(6)包埋:采用JB-4E包埋液进行包埋处理;

(7)切片;

(8)粘片;

(9)染色:采用希夫试剂染色液进行染色。

2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)中,所述小麦颖果为小麦开花后14天、21天和28天的颖果。

3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(2)中,所述FAA固定液用量为小麦颖果体积的10-20倍。

4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(2)中,所述固定的时间为4-24h。

5.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(4)中,所述逐级脱水的程序为:先于70%乙醇静置25-35分钟,再于83%乙醇静置25-35分钟,再于95%乙醇静置25-35分钟,再于100%乙醇静置1-1.5小时,最后更换溶液,于100%乙醇继续静置1-1.5h。

6.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(5)中,所述JB-4I渗透液的组成为:JB-4C:JB-4A=0.1-0.2g:10ml。

7.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(5)中,所述逐级渗透的程序为:先于50%无水乙醇+50%渗透液静置1-2天,然后静置于25%无水乙醇+75%渗透液1-2天,再静置于100%渗透液3-4天,最后更换渗透液,于100%渗透液继续静置3-4天。

8.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(6)中,所述JB-4E包埋液的组成为:JB-4I与JB-4C的体积比=24-26:1。

9.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(9)中,所述希夫试剂的制备方法为:取0.1g碱式品红溶于60-70ml热去离子水,放冷至室温后过滤;加10-12ml偏重亚硫酸钠溶液、2-4ml盐酸,充分搅拌后用水稀释至100ml,放置,放入0.2-0.4g活性炭充分震摇后得无色溶液,将无色溶液转移至棕色瓶中保存,即得希夫试剂。

10.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(9)中,所述热去离子水的温度为70-80℃,偏重亚硫酸钠溶液的浓度为1-1.2g/ml,盐酸的浓度为37%。

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