[发明专利]类干细胞化诱导培养基及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种类干细胞化诱导培养基，其特征在于包括类干细胞化诱导组分、细胞生长营养组分、维生素与细胞因子组分、其他组分和水；其中，

类干细胞化诱导组分为乳酸钾、乳酸、乙醇胺、磷酸乙醇胺、CDP-乙醇胺和磷脂酰乙醇胺；

细胞生长营养组分为葡萄糖、氨基酸与氨基酸盐混合物、胆固醇、亚麻酸、亚油酸、花生四烯酸和棕榈酸；

维生素与细胞因子组分为D-泛酸钙、盐酸吡哆醛、盐酸硫胺素、肌醇、生物素、叶酸、核黄素、维生素C磷酸镁、生育酚、维生素A醋酸酯、甲萘醌、人血白蛋白、转铁蛋白和胰岛素；

其他组分为氯化钠、乙磺酸、盐酸腐胺、超氧化物歧化酶、碳酸氢钠和酚红；

所述的氨基酸与氨基酸盐混合物为α-甘氨酸、L-α-丙氨酸、L-α-精氨酸盐酸盐、L-α-天冬酰胺、L-α-天冬氨酸、L-α-胱氨酸二盐酸盐、L-α-谷氨酸、L-α-谷氨酰胺、L-α-盐酸组氨酸、L-α-异亮氨酸、L-α-亮氨酸、L-α-赖氨酸盐酸盐、L-α-甲硫氨酸、L-α-苯丙氨酸、L-α-脯氨酸、L-α-丝氨酸、L-α-苏氨酸、L-α-色氨酸、L-α-酪氨酸二钠和L-α-缬氨酸的混合物；

所述的类干细胞化诱导组分的组成如下，以类干细胞化诱导培养基的体积计：

乳酸钾40mM、乳酸6mM、乙醇胺1mM、磷酸乙醇胺1mM、CDP-乙醇胺1mM和磷脂酰乙醇胺2mM；

所述的细胞生长营养组分的组成如下，以类干细胞化诱导培养基的体积计：

葡萄糖25-30mM、氨基酸与氨基酸盐混合物、胆固醇0.1-0.12mM、亚麻酸0.2-0.25mM、亚油酸0.2-0.25mM、花生四烯酸0.3-0.5mM和棕榈酸0.1-0.13mM；其中，氨基酸与氨基酸盐混合物的组成为α-甘氨酸0.4-0.5mM、L-α-丙氨酸0.4-0.5mM、L-α-精氨酸盐酸盐0.4-0.5mM、L-α-天冬酰胺0.4-0.5mM、L-α-天冬氨酸0.4-0.5mM、L-α-胱氨酸二盐酸盐0.6-0.7mM、L-α-谷氨酸0.4-0.5mM、L-α-谷氨酰胺2-3mM、L-α-盐酸组氨酸0.6-0.7mM、L-α-异亮氨酸0.6-0.7mM、L-α-亮氨酸0.6-0.7mM、L-α-赖氨酸盐酸盐1-2mM、L-α-甲硫氨酸0.4-0.5mM、L-α-苯丙氨酸0.6-0.7mM、L-α-脯氨酸0.4-0.5mM、L-α-丝氨酸0.4-0.5mM、L-α-苏氨酸0.6-0.7mM、L-α-色氨酸0.6-0.7mM、L-α-酪氨酸二钠0.6-0.7mM和L-α-缬氨酸0.6-0.7mM；

所述的维生素与细胞因子组分的组成如下，以类干细胞化诱导培养基的体积计：

D-泛酸钙0.02-0.03mM、盐酸吡哆醛0.02-0.03mM、盐酸硫胺素0.02-0.03mM、肌醇0.001-0.002mM、生物素0.001-0.002mM、叶酸0.001-0.002mM、核黄素0.002-0.003mM、维生素C磷酸镁3-4.5mM、生育酚0.01-0.02mM、维生素A醋酸酯0.001-0.002mM、甲萘醌0.01-0.02mM、人血白蛋白10-12mM、转铁蛋白0.01-0.02mM和胰岛素0.02-0.03mM；

所述的其他组分的组成如下，以类干细胞化诱导培养基的体积计：

氯化钠80-100mM、乙磺酸50-60mM、盐酸腐胺3-5mM、超氧化物歧化酶1-2mM、碳酸氢钠80-90mM和酚红0.5-0.8mM。

2.一种权利要求1所述的类干细胞化诱导培养基的制备方法，其特征在于将权利要求1所述的类干细胞化诱导组分、细胞生长营养组分、维生素与细胞因子组分和其他组分溶于水后，过滤，得到类干细胞化诱导培养基。

3.一种权利要求1所述的类干细胞化诱导培养基的应用，其特征在于T淋巴细胞筛选富集后得到CD8+ T细胞，将CD8+ T细胞加入到权利要求1所述的类干细胞化诱导培养基中培养，得到类干细胞化的CD8+ T细胞；

所述的培养时间为48-72h。

4.根据权利要求3所述的类干细胞化诱导培养基的应用，其特征在于所述的T淋巴细胞为对数生长期的T淋巴细胞。