[发明专利]一种可精准稳定示踪的深层渗透青蒿素大分子纳米药物及制备方法与应用

说明书

本发明公开了一种可精准稳定示踪的深层渗透青蒿素大分子纳米药物及制备方法与应用。本发明通过利用ROS响应基团偶联青蒿素分子，达到肿瘤细胞内特异性释放青蒿素的目的；利用共价键引入长波长近红外荧光分子，有效提高荧光分子的稳定性，并实现青蒿素纳米药物在体内的精准示踪，准确检测青蒿素在体内的定位；采用透明质酸为载体，有效提高肿瘤的靶向传递能力，并且在酶的作用下释放小尺寸的内核药物，有效提高纳米药物在肿瘤组织的渗透和细胞内化；引入花生四烯酸，产生级联反应，诱导肿瘤细胞的铁死亡。本发明提供的纳米药物能用于肿瘤治疗药物。

技术领域

本发明属于药物传递载体领域，特别涉及一种可精准稳定示踪的深层渗透青蒿素大分子纳米药物及制备方法与应用。

背景技术

青蒿素及其衍生物作为一种创新的抗癌药物，越来越受到人们的关注，在治疗或预防癌症方面同样表现出相当大的潜力。尽管青蒿素及其衍生物作为抗癌药物具有巨大的潜力，但其特殊的过氧基团，对热和还原性物质的影响而分解，在血液循环过程中过早失活，使青蒿素在体内的生物利用度低，达不到临床抗肿瘤治疗的目的。近年来，纳米药物传递系统在诊断治疗领域受到广泛关注，纳米药物能够很好地保持药物的活性，并且可通过EPR效应提高药物对肿瘤组织的靶向传递能力，实现药物特异性释放，既减少毒副作用，又充分发挥药物的疗效，在肿瘤治疗中表现出了很大的优势与潜力。但是，肿瘤组织的异质性和复杂性，难以实现导致纳米药物在实体瘤中的深层传递，严重降低了青蒿素的治疗效果。并且由于青蒿素分子本身没有荧光特性，无法通过直观的方法检测青蒿素在体内的分布和定位，不利于药理分析和毒理分析。

发明内容

本发明的首要目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一种可精准稳定示踪的深层渗透青蒿素大分子纳米药物的制备方法。

本发明的另一目的在于提供通过上述制备方法得到的精准稳定示踪的深层渗透青蒿素大分子纳米药物。

本发明的再一目的在于提供通过上述可精准稳定示踪的深层渗透青蒿素大分子纳米药物的应用。

本发明的目的通过下述技术方案实现：

一种可精准稳定示踪的深层渗透青蒿素大分子纳米药物的制备方法，包括如下步骤：

(1)在有机溶剂介质中，以EDC和DMAP为催化剂，双氢青蒿素和缩硫酮键发生酯化反应，得到ART-TK粗品，甲醇溶液中重结晶ART-TK粗品，得到纯净ART-TK；

(2)将PAMAM树枝状大分子溶解在有机溶剂中，加入步骤(1)制备得到的ART-TK、花生四烯酸(AA)和带有羧基的近红外荧光分子，以DMAP为催化剂，反应后除掉溶剂，透析，得到P-ART/AA/近红外荧光分子；

(3)将步骤(2)获得P-ART/AA/近红外荧光分子溶解在水中，按照PAMAM中残留的氨基和透明质酸中的羧基比例，设定正负电荷比，得到溶液C；将透明质酸溶解在水中，得到透明质酸溶液；将溶液C滴加到透明质酸溶液中，通过静电络合形成复合胶束，得到可精准稳定示踪的深层渗透青蒿素大分子纳米药物。

步骤(1)优选如下：将双氢青蒿素溶解于有机溶剂中，加入EDC和DMAP，避光搅拌混匀；将得到的双氢青蒿素溶液滴入含有缩硫酮键的有机溶剂中，反应；反应结束后浓缩，得到ART-TK粗品，甲醇溶液中重结晶ART-TK粗品，得到纯净ART-TK。

步骤(1)中所述的有机溶剂优选为二氯甲烷、甲醇、乙醇和四氢呋喃中的至少一种。

步骤(1)中所述的有机溶剂的用量优选按每0.1g双氢青蒿素配比10～20mL有机溶剂计算；更优选按每0.1g双氢青蒿素配比15mL有机溶剂计算。

步骤(1)中所述的催化剂的用量优选按双氢青蒿素：催化剂＝质量比0.1：13～14配比；更优选按双氢青蒿素：催化剂＝质量比0.1：13.6配比。