[发明专利]柑橘黄龙病菌SDE3蛋白抗体在检测柑橘黄龙病中的应用在审
申请号: | 202310033293.2 | 申请日: | 2023-01-10 |
公开(公告)号: | CN116298274A | 公开(公告)日: | 2023-06-23 |
发明(设计)人: | 叶健;孙艳伟;赵平芝;杨欢 | 申请(专利权)人: | 中国科学院微生物研究所 |
主分类号: | G01N33/569 | 分类号: | G01N33/569;C07K14/195;C12N15/70;C07K16/12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 柑橘 黄龙 病菌 sde3 蛋白 抗体 检测 中的 应用 | ||
1.抗体在检测植物黄龙病中的应用或在制备检测植株黄龙病的试剂盒中的应用,所述抗体为SDE3蛋白抗原的特异性抗体,所述SDE3蛋白抗原为A1)或A2)的蛋白质:
A1)氨基酸序列是SEQ ID No.2的蛋白质;
A2)在A1)所示的蛋白质的羧基端或/和氨基端融合标签蛋白得到的具有与A1)相同活性的可溶性融合蛋白。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于:所述抗体是以所述SDE3蛋白抗原为免疫原得到的多克隆抗体。
3.根据权利要求1或2所述的应用,其特征在于:所述植物为下述任一种
C1)双子叶植物;
C2)芸香科植物;
C3)柑橘属或柚子属植物;
C4)柑橘、广东红橙、广西砂糖桔、海南三红蜜柚。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于:所述应用中待测样品来自芸香科植物的韧皮部。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的应用,其特征在于:所述SDE3蛋白抗原按照包括如下步骤的方法制备,使所述SDE3蛋白抗原的编码基因在原核微生物中进行表达得到所述SDE3蛋白抗原。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于:所述SDE3蛋白抗原的编码基因的编码链的编码序列是序列SEQ ID No.1。
7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于:使所述SDE3蛋白抗原的编码基因在原核微生物中进行表达包括将所述SDE3蛋白抗原的编码基因导入受体大肠杆菌,得到表达所述SDE3蛋白抗原的重组大肠杆菌,培养所述重组大肠杆菌,表达得到所述SDE3蛋白抗原。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于:所述重组大肠杆菌为将pET-28a-SDE3导入大肠杆菌BL21(DE3)得到的表达氨基酸序列是SEQ ID No.2的蛋白质的重组微生物,所述pET-28a-SDE3为将载体pET-28a(+)的EcoRI和XhoI识别位点间的小片段替换为核苷酸序列是SEQ ID No.1的DNA片段得到的重组载体。
9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于:所述试剂盒含有所述抗体。
10.权利要求1中所述SDE3蛋白抗原或生物材料,所述生物材料为下述任一种:
H1)编码权利要求1中所述SDE3蛋白抗原的核酸分子;
H2)含有H1)所述核酸分子的表达盒;
H3)含有H1)所述核酸分子的重组载体、或含有H2)所述表达盒的重组载体;
H4)含有H1)所述核酸分子的重组微生物、或含有H2)所述表达盒的重组微生物、或含有H3)所述重组载体的重组微生物;
H5)含有H1)所述核酸分子的重组细胞系、或含有H2)所述表达盒的重组细胞系。
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