[发明专利]高产ε-聚赖氨酸的多基因过表达链霉菌工程菌株及方法与应用在审
| 申请号： | 202310027925.4 | 申请日： | 2023-01-09 |
| 公开（公告）号： | CN116042416A | 公开（公告）日： | 2023-05-02 |
| 发明（设计）人： | 谭之磊;裴泽峰;贾士儒;唐鲲鹏;侯颖;周东浩;许倍铭;朱亚新 | 申请（专利权）人： | 天津科技大学 |
| 主分类号： | C12N1/15 | 分类号： | C12N1/15;C12N15/76;C12P13/02;C12R1/525;C12R1/465 |
| 代理公司： | 天津盛理知识产权代理有限公司 12209 | 代理人： | 韩晓梅 |
| 地址： | 300457 天津市滨*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 高产 赖氨酸 多基因 表达 霉菌 工程 菌株 方法 应用 | ||
1.一种高产ε-聚赖氨酸的多基因过表达链霉菌工程菌株，其特征在于：所述菌株同时过表达二氨基庚二酸酯差向异构酶基因dapF和二氨基庚二酸酯脱羧酶基因lysA。
2.根据权利要求1所述的高产ε-聚赖氨酸的多基因过表达链霉菌工程菌株，其特征在于：所述二氨基庚二酸酯差向异构酶基因dapF的基因序列为与SEQ ID No.1一致及具有相同功能的基因序列，所述二氨基庚二酸酯脱羧酶基因lysA的基因序列为与SEQ ID No.3一致及具有相同功能的基因序列。
3.根据权利要求1所述高产ε-聚赖氨酸的多基因过表达链霉菌工程菌株，其特征在于：所述高产ε-聚赖氨酸的多基因过表达链霉菌工程菌株的底盘菌株为产ε-聚赖氨酸的链霉菌属菌株，包括Streptomycesalbulus、Streptomycesdiastatochromogenes、Streptomycesgriseofuscus、Streptomycesahygroscopicus。
4.根据权利要求3所述高产ε-聚赖氨酸的多基因过表达链霉菌工程菌株，其特征在于：所述Streptomycesdiastatochromogenes底盘菌株为S.diastatochromogenes6#-7，Streptomyces diastatochromogenes6#-7的保藏编号为CGMCCNO.22261，保藏日期为2021年5月17日，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所。
5.如权利要求1至3任一项所述的高产ε-聚赖氨酸的多基因过表达链霉菌工程菌株的构建方法，其特征在于：包括如下步骤：
(1)构建带有重组质粒pIMEP::dapF::lysA的E.coliDH5α阳性转化子，提取阳性转化子中的重组质粒pIMEP::dapF::lysA，然后将提取的重组质粒pIMEP::dapF::lysA转化至大肠杆菌E.coliET12567/PUZ8002中，获得E.coliET12567/PUZ8002阳性转化子；
(2)制备链霉菌底盘菌株萌发孢子悬液；
(3)将步骤(1)的E.coliET12567/PUZ8002阳性转化子和步骤(2)萌发的底盘链霉菌孢子悬液分别等体积混合，通过接合转移，得到高产ε-聚赖氨酸的多基因过表达链霉菌工程菌株。
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