[发明专利]一种快速检测TREC拷贝数的引物探针组、试剂盒及其应用

权利要求书

1.用于检测TREC拷贝数的引物探针组，其特征在于，包括用于检测TCRA基因的Jα58区域的引物探针组和用于检测TCRA基因的Jα61区域的引物探针组；

所述用于检测TCRA基因的Jα58区域的引物探针组包括如SEQ ID NO.1所示序列的上游引物、如SEQ ID NO.2所示序列的下游引物、如SEQ ID NO.3所示序列的探针；所述用于检测TCRA基因的Jα61区域的引物探针组包括如SEQ ID NO.4所示序列的上游引物、如SEQ IDNO.5所示序列的下游引物、如SEQ ID NO.6所示序列的探针。

2.一种快速检测TREC拷贝数的试剂盒，其特征在于，包括如权利要求1所述用于检测TCRA基因的引物探针组。

3.根据权利要求2所述试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括内参基因ALB，所述内参基因ALB的上游引物序列如SEQ ID NO.7所示；所述内参基因ALB的下游引物序列如SEQ IDNO.8所示；所述内参基因ALB的探针序列如SEQ ID NO.9所示。

4.根据权利要求2所述试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括用于检测Jα58区域的Taqman荧光探针、用于检测Jα61区域的Taqman荧光探针和用于检测内参基因ALB的Taqman荧光探针序列，其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.10、SEQ ID NO.11和SEQ ID NO.12所示。

5.根据权利要求4所述试剂盒，其特征在于，所述Jα58区域的Taqman荧光探针由进行FAM-NFQ-MGB荧光修饰；所述Jα61区域的Taqman荧光探针由FAM-EclipseDQ进行荧光修饰。

6.根据权利要求3所述试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括用于对TREC进行定量检测的标准品，所述标准品包括具有浓度梯度的人类基因组DNA、含有Jα58的纯净质粒和含有Ja61的纯净质粒。

7.根据权利要求6所述试剂盒，其特征在于，所述人类基因组的DNA浓度梯度为1ng/μL、2ng/μL、4ng/μL、8ng/μL、16ng/μL；所述含有Jα58的纯净质粒的浓度梯度为1×10copies/μL、1×10²copies/μL、1×10³copies/μL、1×10⁴copies/μL、1×10⁵copies/μL；所述含有Jα61的纯净质粒的浓度梯度为1×10copies/μL、1×10²copies/μL、1×10³copies/μL、1×10⁴copies/μL、1×10⁵copies/μL。

8.权利要求3所述试剂盒在新生儿原发性免疫缺陷病早期筛查、造血干细胞移植后胸腺输出功能评价、及HIV感染和治疗过程中免疫重建评估等与T细胞再生相关检测中的应用。