[发明专利]一种生产莫匹罗星的发酵培养基及莫匹罗星的生产方法

说明书

本发明涉及一种生产莫匹罗星的发酵培养基及莫匹罗星的生产方法。本发明通过对发酵培养基及莫匹罗星生产方法的改进，显著提高莫匹罗星发酵水平，在发酵5‑7天时，发酵效价达到12000mg/L以上。整个生产过程发酵物料廉价易得，发酵过程简单易操作,有利于工业化生产。

技术领域

本发明属于生物制药技术领域，具体涉及一种生产莫匹罗星的发酵培养基及莫匹罗星的生产方法。

背景技术

莫匹罗星(Mupirocin)又称假单胞菌酸A，是由荧光假单胞菌发酵产生的一种局部外用抗菌药物，能抑杀多种引起皮肤性疾病的细菌，适用于毛囊炎、疖肿和脓疱病等皮肤病，具有简单易用，经济便宜和副作用小等优点。

目前，莫匹罗星的生产主要通过微生物发酵的方法进行。莫匹罗星的提纯工艺和药物制备工艺报道较多，但关于莫匹罗星的发酵生产工艺报道较少。CN108277243A报道了一种通过发酵过程中补加亚油酸和亮氨酸混合物并流加氨水和柠檬酸钠控制发酵pH 5.5-5.8的方法来生产假单胞菌酸A，采用该方法假单胞菌酸A最终发酵效价达到3462mg/L，该方法虽然能提升发酵效价，但补料和发酵过程控制工艺复杂，成本较高，而最终发酵效价仍然不理想。CN108949845A报道了一种用了制备莫匹罗星的发酵培养基及由发酵培养基制备莫匹罗星的方法，该报道里的发酵培养基物料复杂，操作繁琐，发酵效价达到6000mg/L左右。CN111996136A报道了一种在发酵培养基种添加钼酸钠和尿素的方法生产莫匹罗星的方法，发酵效价最高达到6600mg/L左右。虽然与对照组相比发酵效价有了一定提升，但考虑到钼酸钠可能会导致钼中毒，操作使用过程较为繁琐，该方法发酵效价仍然不是十分理想。

鉴于上述现状，特提出本发明。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明提出一种生产莫匹罗星的发酵培养基及莫匹罗星的生产方法。本发明通过对发酵培养基及莫匹罗星生产工艺的改进，显著提高莫匹罗星的发酵水平，在发酵5-7天，发酵效价达到12000mg/L以上，且整个生产过程发酵物料廉价易得，发酵过程简单易操作，有利于工业化生产。

本发明的技术方案如下：

本发明提供一种生产莫匹罗星的发酵培养基，包括：葡萄糖80-120g/L、黄豆饼粉20-60g/L、棉籽饼粉10-30g/L、硫酸铵1-3g/L；优选地，所述的发酵培养基，包括：葡萄糖100g/L、黄豆饼粉40g/L、棉籽饼粉20g/L、硫酸铵1g/L，所述发酵培养基的pH值为7.5±0.1。

本发明还提供一种莫匹罗星的生产方法，包括：以保藏编号为CGMCC No.25307的荧光假单胞菌(Pseudomonas fluuorescens)HS-PF20-62为生产菌种，采用本发明如上所述发酵培养基进行发酵培养。优选地，所述发酵培养的温度为21℃-23℃。优选地，在所述发酵培养第48-96小时进行分批补料，其特征在于所述补料的物质为葡萄糖溶液；优选地，在所述发酵培养第48小时和第96小时分批补加葡萄糖溶液，每次补加葡萄糖溶液的体积为原发酵培养基体积的4％，所述葡萄糖溶液的质量百分比浓度为50％。

本发明荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)HS-PF20-62的微生物菌种于2022年7月15日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所)，保藏编号为CGMCC No.25307，分类命名为荧光假单胞菌Pseudomonas fluorescens，并登记入册，证明存活。

作为本发明实施方式之一，所述的莫匹罗星的生产方法具体如下：

步骤(1)菌种活化：将低温保藏的保藏编号为CGMCC No.25307的荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)HS-PF20-62接种到平板培养基上，在26±1℃条件下培养24±4小时，得到涂布单菌落；