[发明专利]一种用于膀胱癌诊断或辅助诊断的试剂及试剂盒

说明书

本申请涉及一种用于膀胱癌诊断或辅助诊断的试剂及试剂盒。该试剂包括检测目标区域的甲基化水平的试剂，所述目标区域包括Chr1:3746525‑3747320、Chr1:16226730‑16227150、Chr1:16227533‑16228079、Chr1:63319620‑63320656和Chr1:90726838‑90727252中至少一个区域的全长或部分区域。本申请通过检测所述目标区域的甲基化水平可以对膀胱癌进行诊断或辅助诊断，具有非侵入性的、便捷的、高灵敏度的特性，有望提高我国膀胱癌的检出率，降低该疾病的发病率与死亡率。

技术领域

本申请涉及分子生物学领域，特别是涉及一种用于膀胱癌诊断或辅助诊断的试剂及试剂盒。

背景技术

膀胱癌是全球第十大常见癌症，好发于男性，其在男性群体中的发病率和死亡率在癌症排名中分别居于第6位和第9位。在确诊膀胱癌时，大约75％的患者被诊断为非肌层浸润性膀胱癌(NMIBC)，约25％的患者被诊断为肌层浸润性膀胱癌(MIBC)。对于NMIBC和MIBC，其治疗方式和临床结果具有显著的差别。NMIBC通常未侵袭膀胱肌层，预后相对较好，可经尿道电切术治疗，但是其易复发，且存在发展为MIBC的可能性。MIBC通常已侵袭膀胱肌层，患者需要行根治性膀胱切除术进行治疗，且需要根据肿瘤的病理特征执行相应的化疗方案，对于已经发生转移的晚期膀胱癌患者，其存活率低于5％。因此，对膀胱癌患者进行早期诊断和早期治疗，是提高其生活质量和生命周期关键途径。

目前临床上常用的诊断膀胱癌的方法包括：膀胱镜、尿液脱落细胞学、荧光原位杂交(FISH)等。膀胱镜及病理活检是诊断膀胱癌的金标准，但是其作为侵入性检查，患者需要进行麻醉，且存在尿道穿孔、尿道感染等风险，导致患者的痛苦度高、接受度低。尿液脱落细胞学检查和荧光原位杂交法为非侵入性操作，其诊断膀胱癌的特异性较好，但是这两种方法对于早期非肌层浸润性癌的诊断灵敏度较低，且其诊断的准确性依赖于医师的诊断经验。因而，目前急需非侵入性的、便捷的、高灵敏度的诊断膀胱癌的方法。

膀胱癌的一个常见特征即癌细胞表观遗传机制的改变。表观遗传学是指在基因的DNA序列未发生改变的情况下，基因功能发生了可遗传的变化，最终导致了表型的变化。DNA甲基化、组蛋白变异、染色质重塑和组蛋白翻译后修饰等是影响基因表达的主要表观遗传机制。总体看来，在癌细胞的基因组中，其DNA的甲基化程度降低，有助于原癌基因的过度表达、突变率的增加等；与此同时，其抑癌基因启动子区域的DNA则会高度甲基化，从而抑制抑癌基因的表达，有利于肿瘤侵袭、转移和血管生成。因此，异常的DNA甲基化可能作为膀胱癌诊断、预后和治疗的分子标记物。

发明内容

基于此，为解决目前尚无高灵敏度且无创的诊断或辅助诊断膀胱癌的方法，有必要提供一种用于膀胱癌诊断或辅助诊断的试剂及试剂盒。

具体技术方案如下：

一种用于膀胱癌诊断或辅助诊断的试剂，所述试剂包括检测目标区域的甲基化水平的试剂，所述目标区域包括如下至少一个区域的全长或部分区域：区域1、区域2、区域3、区域4和区域5；

其中，以GRCh38.p14为参考基因组，所述区域1为Chr1:3746525-3747320，所述区域2为Chr1:16226730-16227150，所述区域3为Chr1:16227533-16228079，所述区域4为Chr1:63319620-63320656，所述区域5为Chr1:90726838-90727252。

在其中一个实施例中，所述区域1的部分区域包括区域1-1、区域1-2、区域1-3、区域1-4和区域1-5中的一个或多个；所述区域1-1为Chr1:3746525-3746671，所述区域1-2为Chr1:3746695-3746839，所述区域1-3为Chr1:3746854-3746987，所述区域1-4为Chr1:3747021-3747165，所述区域1-5为Chr1:3747172-3747320。