[发明专利]一种苗期鉴定不结球白菜花瓣花色的方法

说明书

本发明公开了一种苗期鉴定不结球白菜花瓣花色的方法。该方法以不结球白菜品种DNA作为模板，采用引物组wF35通过聚合酶链反应（PCR）扩增该片段，根据电泳后目的条带的大小，可在抽薹开花前初步推断不结球白菜品种花瓣颜色，筛选相应花色品种。本发明提供的方法，可以快速检测不结球白菜品种花色，实现对花色的早期精准预测，极大的节约时间和资源，大大提高选择效率，从而加快育种进程，在生产实践中也具有重要作用。

技术领域

本发明属于分子生物学技术领域，具体涉及一种苗期鉴定不结球白菜花瓣花色的方法。

背景技术

不结球白菜（Brassica campestris ssp. chinensis Makino）属十字花科芸薹属芸薹种白菜亚种。芸薹属植物中常见的花色为黄色，也存在白色、橙色等变异颜色。花色性状稳定遗传，容易观察，能作为标记性状、对杂株进行鉴定，在生产实践中具有重要作用。不结球白菜在我国广泛种植，其产量和品质是极被关注的特性。花是不结球白菜重要的生殖器官，对不同品种的花色进行初步鉴定，有助于加快不结球白菜花色性状的育种进程，培育出更多花色丰富的不结球白菜品种。

因此，设计专用于不结球白菜黄色花瓣/白色花瓣品种或材料的筛选、鉴定方法极为重要。

发明内容

本发明的目的是提供一种苗期鉴定不结球白菜黄色花瓣/白色花瓣的方法，借助引物组wF35可快速鉴定待测品种或材料的花瓣颜色，以及实现在抽薹开花前对花色的准确预测，加速育种进程。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种用于鉴定不结球白菜黄色花瓣/白色花瓣的试剂盒，包括引物组wF35，所述引物组wF35的序列为：

wF35F：5’-CGAAACGAAGAAGAAGAGTCC-3’ （SEQ ID NO.1），

wF35R：5’-GGGTGGGAACAAAAGAGCTAC-3’ （SEQ ID NO.2）。

上述试剂盒在鉴定不结球白菜黄色花瓣或白色花瓣中的应用。

一种苗期鉴定不结球白菜花瓣花色的方法，包括以下步骤：

步骤1，提取待鉴定品种或材料的基因组DNA；

步骤2，以步骤1提取的DNA为模板，利用上述试剂盒中的引物组wF35对其进行PCR扩增；

步骤3，以步骤2的PCR扩增产物进行聚丙烯酰胺电泳分离，获得待鉴定品种或材料的带型，如果得到115bp的片段，则说明待鉴定品种或材料的花瓣为黄色；如果得到93bp的片段，则说明待鉴定品种或材料的花瓣为白色。

进一步地，步骤2中，PCR扩增的体系为：在10μL反应体系中，50ng/μL DNA模板1μL、10μM wF35引物各0.5μL、2× Primer Star 5μL、去离子水3μL；PCR扩增程序为：95℃预变性2min，98℃变性30s，55.7℃退火30s，72℃延伸30s，72℃后延伸10min，35个循环，4℃保存。

有益效果：

1. 本发明通过使用标记引物组wF35，可在抽薹开花前快速、高效的鉴定不结球白菜品种或材料的花瓣颜色。

2. 本发明辅助选择方便，节约成本。若在花期对不结球白菜的花色进行筛选，则前期耗费周期长，成本高，消耗人力物力大。借助本发明，可实现苗期选择，减少工作量，提高选择效率。

3. 花不仅是不结球白菜重要的生殖器官还具有一定的观赏价值。花色的早期鉴定有助于加快不结球白菜的育种进程，进而快速培育出更多花色丰富的不结球白菜品种，具有更为深远的观赏意义。

附图说明