[发明专利]基于靶向GRP94避开正常脑细胞的乳腺癌脑转移瘤的靶向递药系统及其制备方法

说明书

本发明公开了基于靶向GRP94避开正常脑细胞的乳腺癌脑转移瘤的靶向递药系统及其制备方法。以生物可降解高分子材料为基础载体，制备表面修饰GRP94抗体或者靶向肽OmpA的递药系统，可通过靶向GRP94穿透血脑屏障，基于正常脑细胞膜上GRP94的缺乏，特异性识别乳腺癌脑转移细胞而非正常脑细胞。相较于其他跨越血脑屏障用于脑靶向递药的靶点受体，靶向GRP94更加特异性地靶向脑转移肿瘤细胞。GRP94仅在血脑屏障内皮细胞和乳腺癌脑转移细胞的表面表达，不会导致颅内正常区域的药物积累和神经毒性，使得GRP94成为一种新颖的脑转移靶向递药靶点。

技术领域

本发明属于纳米生物医药技术领域，具体涉及一种基于靶向GRP94避开正常脑细胞的乳腺癌脑转移瘤的靶向递药系统及其制备方法。

背景技术

脑转移瘤是当今最常见的颅内肿瘤之一，约20％的癌症病人会发生癌细胞的脑转移，尽管手术、放疗、化疗、靶向治疗和免疫治疗在内的临床治疗取得了进展，但目前的预后效果仍然不佳。目前临床的治疗方案首选手术、放疗和化疗的手段，但由于血脑屏障的存在及脑转移瘤多小病灶和浸润性的特点，不能有效根除肿瘤，并且以上治疗方法具有极大的副作用，因此开发高效的脑转移瘤靶向的药物传递系统成为迫在眉睫的社会问题。目前，大多数临床前和临床工作都集中于解决血脑屏障(BBB)问题，目的是提高药物的入脑性。目前研究表明可介导入脑的BBB受体包括转铁蛋白受体、低密度脂蛋白受体相关蛋白1(LRP1)、N-甲基D-天冬氨酸受体(NMDAR)和烟碱乙酰胆碱受体。然而，通过这些受体介导入脑存在一定的风险，以上可介导穿通BBB受体在正常脑实质区域也有表达，如正常神经元、星形胶质细胞和周细胞中都存在LRP1的表达。以上受体在颅内正常表达会导致不必要的颅内药物积聚和神经毒性。因此，迫切需要发现仅在血脑屏障和病变细胞的细胞膜上表达的新型药物递送靶点，穿透血脑屏障后有效避开正常脑细胞并到达脑实质内的病变区域。

发明内容

本发明目的是提供基于靶向GRP94避开正常脑细胞的乳腺癌脑转移瘤的靶向递药系统及其制备方法。

本发明的技术方案是：

基于靶向GRP94避开正常脑细胞的乳腺癌脑转移瘤的靶向递药系统，利用生物可降解的高分子材料制备可装载药物的纳米粒作为基础载体，所述生物可降解的高分子材料为聚乳酸-羟基乙酸，所述纳米粒表面修饰GRP94抗体或靶向肽OmpA。

本发明的另一技术方案是：

基于靶向GRP94避开正常脑细胞的乳腺癌脑转移瘤的靶向递药系统的制备方法，该方法包括：

(1)称取高分子材料，溶于有机溶剂中，形成油相；

(2)将药物阿霉素与探针Dir溶解在油相中，成为油相的一部分，水相为水本身，或者将药物溶解于水中，形成水相；

(3)将所述水相逐滴加入涡旋的油相中，超声乳化形成油包水的乳剂；

(4)再将所述乳剂逐滴加入涡旋的外水相中，超声乳化形成水包油包水型的复乳；

(5)迅速将所述复乳倒入挥发水相中，搅拌过夜挥发，形成纳米粒混悬液；

(6)将所述纳米粒混悬液低速离心留取上清液；

(7)将所述上清液通过高速离心提纯，获得提纯且未修饰的纳米粒沉淀；

(8)将所述纳米粒沉淀超声分散于缓冲液中，表面修饰功能连接分子，在室温下反应1-2h后通过高速离心除去过量的功能连接分子，沉淀，获得表面修饰功能连接分子的纳米粒；

(9)将所述表面修饰功能连接分子的纳米粒超声分散于缓冲液中，通过功能连接分子在表面修饰GRP94抗体或者靶向肽OmpA，反应1-2h后高速离心，得到表面修饰的GRP94抗体或靶向肽OmpA纳米粒；