[发明专利]一株无特定抗性基因枯草芽孢杆菌及应用

说明书

本发明公开了一株无特定抗性基因枯草芽孢杆菌，所述无特定抗性基因枯草芽孢杆菌命名为BSC6ΔA8菌，在中国典型培养物保藏中心的保藏号为CCTCC NO:M20221478。以该无特定抗性基因枯草芽孢杆菌对克林霉素、林可霉素、链霉素和螺旋霉素的抗生素浓度响应更敏感，生物安全性更高。在与小麦秸秆混合发酵48 h后，能有效破坏小麦秸秆的表面形态结构，可降低小麦秸秆的纤维素结晶度约6%，降低小麦秸秆的中性洗涤纤维（NDF）和酸性洗涤纤维（ADF）含量分别为6.6%和12.1%，具备进一步应用于生物饲料生产及动物益生菌产品开发的潜力。

技术领域

本发明属于微生物基因工程技术领域，具体涉及一株无特定抗性基因枯草芽孢杆菌及应用。

背景技术

21世纪以来，抗生素在畜牧行业的滥用引起了世界各国的高度重视，欧盟、日本、韩国、美国等先后出台政策禁止将抗生素作为饲料添加剂使用。我国农业农村部于2019年7月发布公告，要求自2020年7月起所有饲料生产企业不得生产含有促生长类药物饲料添加剂(中药类除外)的产品，这标志着我国开始全面禁用促生长类抗生素。2021年11月1日，我国农业农村部办公厅发布了《直接饲喂微生物和发酵制品生产菌株鉴定及其安全性评价指南》的通知(农办牧〔2021〕43号)，指南规定了饲用微生物和发酵用菌株鉴定及安全性评价的基本原则、基本要求、评价方法和结果判定，对于保障我国饲料和养殖产品质量和安全、促进畜牧行业高质量发展具有重要意义。而当生产菌株是细菌时，应当开展抗菌药物敏感性评价，尤其需要关注的抗菌药物包括世界卫生组织(World Health Organization，WHO)分类的极为重要抗菌药物(Critically important antimicrobials，CIAs)和高度重要抗菌药物(Highly important antimicrobials，HIAs)；并需要结合全基因组测序分析，综合判定菌株是否具有获得性耐药。

枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis，B.subtilis)是公认的安全益生菌株(generally recognized as safe,GRAS)，亦是我国《饲料添加剂品种目录(2013)》准用菌种，在畜牧业养殖“禁抗”的大背景下，常作为“益生菌替抗”技术的候选菌种。其被动物采食后可以提高粗饲料利用率，调节肠道微生物菌群平衡，增强动物免疫力，促进生长发育，在畜禽养殖业中应用广泛。但是，以往在畜禽养殖实际生产中使用的枯草芽孢杆菌多为源于自然环境的野生型菌株，遗传背景不清晰，对其基因组序列中含有的抗生素耐药性基因序列信息掌握不全面，部分菌株表现出抗生素耐药性表型，当在畜牧养殖中生产应用时，存在抗生素耐药性基因漂移风险以及饲料卫生与安全隐患，有通过食物链传播影响动物和人类健康的潜在危险。因此，获得不含有CIAs和HIAs耐药性基因的枯草芽孢杆菌，能够更加满足畜禽养殖业中饲用微生物添加的生物安全性要求。

发明内容

为了解决上述问题，本发明的目的在于，提供一株无特定耐药性基因枯草芽孢杆菌及其在粗饲料降解中的应用。

为了实现上述任务，本发明采取如下的技术解决方案：

一种无特定抗性基因枯草芽孢杆菌，其特征在于，该无特定抗性基因枯草芽孢杆菌命名为BSC6ΔA8，在中国典型培养物保藏中心的保藏号为CCTCC NO:M20221478。

所述无特定抗性基因枯草芽孢杆菌为中国典型培养物保藏中心命名的菌株 Bacillus subtilisC6的衍生菌株，所述菌株 Bacillus subtilisC6在中国典型培养物保藏中心的保藏号为CCTCC NO:M20221478。