[发明专利]一种核酸提取试剂盒及其应用在审
| 申请号: | 202211432072.4 | 申请日: | 2022-11-16 |
| 公开(公告)号: | CN115678895A | 公开(公告)日: | 2023-02-03 |
| 发明(设计)人: | 韩亮;冯涛;邹浩;许诗怡 | 申请(专利权)人: | 苏州颐坤生物科技有限公司 |
| 主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C12Q1/6806 |
| 代理公司: | 北京精金石知识产权代理有限公司 11470 | 代理人: | 张黎 |
| 地址: | 215123 江苏省苏州市苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 核酸 提取 试剂盒 及其 应用 | ||
1.一种试剂盒,其特征在于,包括裂解液1、裂解液2、结合液、漂洗液、洗脱液和磁珠;
所述的裂解液1包括异硫氰酸胍、三羟甲基氨基甲烷、EDTA和Triton X-100;
所述的裂解液2包括蛋白酶K和SDS;
所述的结合液包括盐酸胍、Tris-HCl和异丙醇;
所述的漂洗液包括乙醇和Tris-HCl;
所述的洗脱液包括Tris-HCl和EDTA;
所述的磁珠选自超顺磁性二氧化硅磁珠、二氧化钛磁珠、羧基磁珠、氨基磁珠中的至少一种;
所述的裂解液1,以质量体积份计,包括15-50份异硫氰酸胍,0.3-4份三羟甲基氨基甲烷,1-7份EDTA和0.8-1.2份Triton X-100。
2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述的裂解液1,以质量体积份计,还包括35-50份盐酸胍和0.1-0.5份脱氧胆酸钠。
3.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述的结合液,以质量体积份计,包括30-50份盐酸胍。
4.根据权利要求3所述的试剂盒,其特征在于,所述的结合液,以体积份计,包括0.6-4份的Tris-HCl和30-50份的异丙醇。
5.根据权利要求4所述的试剂盒,其特征在于,所述的结合液,以质量体积份计,还包括1-4份月桂酰基氨酸钠。
6.根据权利要求5所述的试剂盒,其特征在于,所述的结合液,以体积份计,还包括5-10份的EDTA。
7.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述的漂洗液,以体积份计,包括70-80份乙醇和1-2份Tris-HCl。
8.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述的洗脱液,以体积份计,包括1-2份Tris-HCl和1-2份EDTA。
9.一种核酸提取的方法,其特征在于,使用权利要求1-8任一项所述的试剂盒进行核酸提取。
10.根据权利要求9所述的方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤S1:对生物样品进行前处理,得待测样本;
步骤S2:向待测样本中加入裂解液1,混匀,离心后加入裂解液2,混匀,离心后孵育,得混合液;
步骤S3:将混合液进行提取,得洗脱核酸;
步骤S4:对洗脱核酸进行核酸质量检测。
11.根据权利要求10所述的方法,其特征在于,所述的步骤S3包括以下步骤:
步骤S31:在槽位1加入磁珠、醇类溶剂和混合液,在槽位2加入结合液,在槽位3加入漂洗液,在槽位4加入洗脱液;
步骤S32:依次运行程序:槽位1运行醇洗程序,槽位2运行结合程序,槽位3运行漂洗程序,槽位4依次运行洗脱程序1和运行洗脱程序2,槽位3运行弃磁珠程序;
步骤S33:吸取槽位4液体,得洗脱核酸。
12.根据权利要求1-8任一项所述的试剂盒在组织脱落细胞中进行核酸提取的应用。
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