[发明专利]一种高抗凝血海参肠多糖及其制备方法与应用

说明书

本发明公开了一种高抗凝血海参肠多糖及其制备方法与应用，属于海洋生物多糖制备技术领域。本发明的高抗凝血海参肠多糖分子量为171.5kDa，单糖组成包括岩藻糖，总糖含量为53.36％，蛋白含量为0.67％，硫酸基含量为28.31％。其对活化部分凝血酶时间(APTT)，凝血酶时间(TT)，凝血酶原时间(PT)均有显著的延长作用，尤其是对APTT的延长作用，显著高于肝素，且浓度为50μg/mL时，APTT已达500s以上；还可显著降低纤维蛋白原(FIB)含量。本发明的高抗凝血海参肠多糖是一种多作用机制、高抗凝血、高纯度岩藻多糖，将海参肠变废为宝，提高海参产业附加值，同时减轻环境压力。

技术领域

本发明属于海洋生物多糖制备技术领域，具体涉及一种高抗凝血海参肠多糖及其制备方法与应用。

背景技术

公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

海参具有极高的营养价值和药用价值，自古就被视为营养滋补佳品和名贵药材，位列“海八珍”之一。我国海参产业发展迅速，2020年，产值已超过600亿元。近年来，海参精深加工行业逐渐兴起。但是，总体而言，海参加工工业仍处于传统加工阶段，加工模式粗放，加工过程中往往会产生大量残体、下脚料、废液等，不仅造成资源浪费，而且会对周围环境形成严重的污染。开发利用海参加工废弃物，对于海参行业意义重大。海参肠是海参加工过程中主要的一种废料，通常被丢弃，利用度不高，但是，研究表明，海参肠中含有多种活性物质，如多糖、蛋白质、皂苷、益生菌等。如果提取其中活性成分，将其应用于食品营养和药学领域，将极大提高海参产业附加值，也可减轻环境污染。

海参多糖是海参中重要的活性成分之一，近年来研究较多，但是，主要集中在体壁多糖，海参肠多糖的研究十分有限。从海参肠中获取高活性多糖成分，对海参肠的开发利用具有重要意义。心脑血管疾病是当今世界上威胁人类最严重的疾病之一，传统抗凝血药物中，肝素统领市场长达半个多世纪，但是肝素具有多种副作用，且肝素在其主要制备原料如猪肠和牛肺中浓度低。近年来“疯牛病”等动物疾病频发，也导致肝素类药物安全性下降。因此，寻找新的肝素替代资源成为国际上的研究热点。海洋多糖已被证明具有良好的抗凝血活性，但是大部分海洋多糖的抗凝活性与肝素相比仍有一定差距。基于此，为了更好的开发利用海参加工副产物，提高海参产业附加值，同时寻找肝素类似物，本申请提供一种高抗凝血海参肠多糖及其制备方法。

发明内容

为了解决现有技术的不足，本发明的目的是提供一种高抗凝血海参肠多糖及其制备方法与应用，本发明提供的高抗凝血海参肠多糖显著延长APTT，延长作用高于肝素，且浓度为50μg/mL时，APTT已达500s以上；浓度为200μg/mL以内时，即可显著延长TT，PT，降低FIB含量。

为了实现上述目的，本发明的技术方案为：

一方面，一种高抗凝血海参肠多糖，所述高抗凝血海参肠多糖分子量为25.1-171.5kDa，单糖组成包括岩藻糖；

所述海参肠多糖从海参肠中提取获得。

另一方面，上述高抗凝血海参肠多糖的制备方法，包括如下步骤：

S1、将海参肠干燥粉碎、脱脂；

S2、向脱脂后的海参肠粉中加入乙酸钠缓冲液、木瓜蛋白酶、EDTA及半胱氨酸进行酶解提取，提取后固液分离，收集上清液；

S3、向上清液中加入氯化十六烷基吡啶CPC溶液，室温反应10-30h，收集沉淀；

S4、将沉淀溶解于NaCl∶乙醇混合溶液中，搅拌均匀后与乙醇混合静置，收集沉淀部分；

S5、将步骤S4所得沉淀用乙醇洗涤、烘干后，透析脱盐，浓缩、冻干得到混合海参肠多糖；