[发明专利]一株耐多粘菌素产超广谱β-内酰胺酶大肠杆菌EC382-2-2及其应用在审
| 申请号： | 202211406804.2 | 申请日： | 2022-11-10 |
| 公开（公告）号： | CN115725462A | 公开（公告）日： | 2023-03-03 |
| 发明（设计）人： | 黄远斌;张淑红;代京莎;杨广珠;吴清平;张菊梅;陈玲;刘欣琪;吴诗;古其会;张友雄;韦献虎 | 申请（专利权）人： | 广东省科学院微生物研究所（广东省微生物分析检测中心） |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12Q1/02;C12N15/11;C12Q1/689;C12Q1/6851;C12Q1/686;C12R1/19 |
| 代理公司： | 广州科粤专利商标代理有限公司 44001 | 代理人： | 朱聪聪;刘明星 |
| 地址： | 510070 广东省*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一株耐 多粘菌素 广谱 内酰胺 大肠杆菌 ec382 及其 应用 | ||
1.大肠杆菌(Escherichia coli)EC382-2-2，保藏编号为GDMCC No：62929。
2.权利要求1所述的大肠杆菌EC382-2-2在作为筛选新型抗菌药物的模式菌株中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，是大肠杆菌EC382-2-2作为模式菌株在筛选抗大肠杆菌的功能微生物、药物、制剂或抗菌材料中的应用。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的功能微生物、药物、制剂或抗菌材料是抑制耐氨苄西林、阿莫西林克拉维酸、头孢噻肟、多粘菌素E、庆大霉素、环丙沙星、复方新诺明、四环素和氟苯尼考的大肠杆菌的功能微生物、药物、制剂或抗菌材料。
5.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的大肠杆菌EC382-2-2可作为筛选抗生素药物的对照或模式菌株，用于辅助筛选食品微生物防控和临床治疗靶向药物。
6.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的大肠杆菌EC382-2-2作为检测耐药基因mcr-1/CTX-M-55和毒力基因eae的参照菌株。
7.一种能够特异性鉴别权利要求1所述的大肠杆菌EC382-2-2的核苷酸序列，其特征在于，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
8.一种特异性鉴别权利要求1所述的大肠杆菌EC382-2-2的引物，其特征在于，包括：F:5’-TAGAAGGCTCTTTGGAAGCA-3’和R:5’-GACCGGACATCATCAGGAAG-3’。
9.一种特异性鉴别权利要求1所述的大肠杆菌EC382-2-2的方法，其特征在于，是用权利要求8所述的引物对待测大肠杆菌进行PCR扩增或qPCR扩增，如果能够产生条带/信号，待测菌则为大肠杆菌EC382-2-2，如果不能产生条带/信号，待测菌不为大肠杆菌EC382-2-2。
10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述的PCR扩增，其扩增体系为25μL，包括12.5μL PCR mixture，10μmol/L上、下游引物各1.0μL，8.5μL ddH2O，2.0μLDNA模板；所述的PCR扩增，其扩增条件如下：95℃预变性5min；95℃变性30s，58℃退火45s，72℃延伸60s，进行30个循环，最后72℃延伸10min。
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