[发明专利]一种生物发酵培养制备paraherquamide A的方法在审
申请号: | 202211386421.3 | 申请日: | 2022-11-07 |
公开(公告)号: | CN115960727A | 公开(公告)日: | 2023-04-14 |
发明(设计)人: | 徐金钟;王品美;陈晓娜;彭加飞 | 申请(专利权)人: | 浙江大学;极致生物技术(杭州)有限公司 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12P17/18;C12R1/80 |
代理公司: | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人: | 沈金龙 |
地址: | 310058 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 生物 发酵 培养 制备 paraherquamide 方法 | ||
1.一种产paraherquamide A的青霉菌,其特征在于,命名为青霉(Penicillium sp.),株号KWF31,保藏号CCTCC NO.M 20221625。
2.一种生物发酵培养制备paraherquamide A的方法,其特征在于,包括以下步骤:在培养基中接种权利要求1所述青霉菌并进行发酵培养,发酵培养完成后分离纯化获得化合物paraherquamide A,
其中,培养基中碳源为蔗糖、葡萄糖、麦芽糖和可溶性淀粉中的至少一种;
氮源为蛋白胨、黄豆饼粉、酵母粉和硝酸盐中的至少一种;
接种量为孢子终浓度为105~107sp/mL;
发酵培养温度为20~30℃,发酵培养时初始pH为6.0~9.0。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,培养基中碳源包括可溶性淀粉,可溶性淀粉质量体积比浓度为0.5%~4%;优选的,可溶性淀粉质量体积比浓度为2%~2.5%。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,培养基中碳源包括可溶性淀粉和葡萄糖,其中,葡萄糖的质量体积比浓度为0.5%~4%。
5.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,氮源包括酵母粉,酵母粉质量体积比浓度为0.3%~2.4%;优选的,酵母粉的质量体积比浓度为0.9%~1.8%。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,氮源包括酵母粉和硝酸盐,其中,硝酸盐的质量体积比含量为0.2%~1.6%;优选的,硝酸盐的质量体积比含量为0.6%~1.2%;更优选的,硝酸盐的质量体积比含量为0.6%~0.8%。
7.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,培养基中还包括无机盐,无机盐包括MgSO4、MnCl2、ZnSO4和CoCl2中的至少一种,
MgSO4的质量体积比浓度为0.0125%~0.2000%;MnCl2的质量体积比浓度为0.02%~0.04%;ZnSO4的质量体积比浓度为0.04%~0.08%;CoCl2的质量体积比浓度为0.0025%~0.0400%。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,无机盐包括MgSO4、MnCl2、ZnSO4和CoCl2,其中,MgSO4的质量体积比浓度为0.1%,MnCl2的质量体积比浓度为0.004%,ZnSO4的质量体积比浓度为0.004%,CoCl2的质量体积比浓度为0.0005%。
9.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,发酵培养时接种量为孢子终浓度为105~106sp/mL;发酵培养温度为20~27℃;发酵培养时初始pH为7.0~7.5。
10.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,分离纯化时使用大孔吸附树脂进行吸附,然后使用体积比浓度为20%的乙醇洗去杂质,然后使用体积比浓度为80%的乙醇解吸;大孔吸附树脂型号为SP825L。
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