[发明专利]一种葡萄糖脱氢酶酶活测定方法在审
| 申请号： | 202211359401.7 | 申请日： | 2022-11-02 |
| 公开（公告）号： | CN115927534A | 公开（公告）日： | 2023-04-07 |
| 发明（设计）人： | 俞志豪;景成宇 | 申请（专利权）人： | 可孚医疗科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/32 | 分类号： | C12Q1/32;G01N21/31;G01N21/78;G01N1/28 |
| 代理公司： | 长沙正奇专利事务所有限责任公司 43113 | 代理人： | 郭立中;聂午阳 |
| 地址： | 410000 湖*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 葡萄糖 脱氢酶 测定 方法 | ||
1.一种葡萄糖脱氢酶酶活测定方法，其特征在于包括以下步骤：
S1.在PMS反应溶液中加入待测的葡萄糖脱氢酶液，反应完成后立即加入酸调节溶液pH≤3.0终止葡萄糖脱氢酶反应，离心、去除上清液保留沉淀；
S2.取DCIP检测溶液，测量DCIP检测溶液在600nm处的初始吸光值，在S1的沉淀中加入DCIP检测溶液，得到混合溶液，反应结束后再次测量混合溶液在600nm下的反应后吸光值，将反应后吸光值与初始吸光值的差值代入DCIP标准曲线计算得参与反应的DCIP摩尔质量，计算得葡萄糖脱氢酶的酶活数值。
2.根据权利要求1所述的葡萄糖脱氢酶酶活测定方法，其特征在于，S1中所述酸为冰乙酸。
3.根据权利要求1所述的葡萄糖脱氢酶酶活测定方法，其特征在于，所述PMS反应溶液的浓度≤1mmol/L，优选地，PMS浓度≤0.050mmol/L。
4.根据权利要求1-3任一项所述的葡萄糖脱氢酶酶活测定方法，其特征在于，所述PMS反应溶液的pH＝6.5-7.5。
5.根据权利要求4所述的葡萄糖脱氢酶酶活测定方法，其特征在于，采用冰醋酸调节所述PMS反应溶液的pH。
6.根据权利要求1-3任一项所述的葡萄糖脱氢酶酶活测定方法，其特征在于，S1中去除上清液保留沉淀在惰性气体保护下进行。
7.根据权利要求1-3任一项所述的葡萄糖脱氢酶酶活测定方法，其特征在于，S1中反应完成的时间为1分钟。
8.根据权利要求1-3任一项所述的葡萄糖脱氢酶酶活测定方法，其特征在于，S1中PMS反应溶液与葡萄糖脱氢酶液的体积比8-12:1。
9.根据权利要求1-3任一项所述的葡萄糖脱氢酶酶活测定方法，其特征在于，所述PMS反应溶液配置的具体步骤为PMS:葡萄糖＝1:10-1:100mmol/L，Tris的浓度为50-200mmol/L，配置好后避光4℃保存。
10.根据权利要求1-3任一项所述的葡萄糖脱氢酶酶活测定方法，其特征在于，所述DCIP检测溶液配置的具体步骤为DCIP与PMS的浓度比为1:2，Tris的浓度为50-200mmol/L，用冰乙酸调节pH＝6.5-7.5，避光保存备用。
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