[发明专利]一种阿留申、肠炎、犬瘟热病检测的方法

权利要求书

1.一种水貂阿留申、肠炎、犬瘟热病毒三重TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法，其步骤包括：

(1)样品采集与制备

(2)病毒核酸提取

(3)取反应体系管置于室温融化，用移液器吸取模板2μL加入反应体系管中，用离心机离心30s，离心结束放入荧光定量PCR仪器中，使用程序进行扩增检测。

2.根据权利要求1所述的水貂阿留申、肠炎、犬瘟热病毒三重TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法，其特征在于，样品采集过程具体操作为：将拭子用无菌生理盐水沾湿，收集眼鼻肛门分泌物样品，再将拭子插入无菌生理盐水采样管中，涡旋震荡混匀，取上清液200μL于1.5ml PCR反应管中；粪便提取方法为取少量粪便，按1：10的比例加入生理盐水混匀后12000rpm离心，取200μL上清液于1.5ml PCR反应管中。

3.根据权利要求1所述的水貂阿留申、肠炎、犬瘟热病毒三重TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法，其特征在于，扩增程序为程序为37℃180s；95℃120s；95℃10s，52℃30s，40个循环。

4.一组用于水貂阿留申、肠炎、犬瘟热病毒三重TaqMan荧光定量RT-PCR检测的探针和引物，其特征在于，所述探针与引物的核苷酸序列为SEQ ID No.1，SEQ ID No.2，SEQ IDNo.3，SEQ ID No.4，SEQ ID No.5，SEQ ID No.6，SEQ ID No.7，SEQ ID No.8，SEQ ID No.9.

5.如权利要求4所述探针与引物在水貂阿留申、肠炎、犬瘟热病毒检测中的应用。

6.如权利要求1所述的三重TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法在水貂阿留申、肠炎、犬瘟热病毒检测中的应用。