[发明专利]一种产卵孢素球孢白僵菌菌株及其在CZB中合成卵孢素的应用

说明书

本发明公开了一种产卵孢素球孢白僵菌菌株及其在CZB中合成卵孢素的应用，ops3是球孢白僵菌卵孢素合成基因簇中的转录因子，超量表达ops3能使球孢白僵菌在营养丰富的PDB和SDB中大量合成卵孢素，但却不能在营养贫瘠的CZB中合成卵孢素。本发明利用基因超量和敲除技术，在ops3超量表达的球孢白僵菌菌株中，破坏掉一个β‑葡萄糖苷酶基因Bbbgli1，获得了ΔBbbgli1‑ops3supgt;OE/supgt;菌株，所得菌株在营养贫瘠的CZB培养基中能够大量产生卵孢素，而且菌株生长不受影响，为卵孢素大量生物合成提供了一个经济、高效的技术方案。

技术领域

本发明涉及卵孢素生物合成技术领域，具体涉及一种产卵孢素球孢白僵菌菌株及其在CZB中合成卵孢素的应用。

背景技术

球孢白僵菌( Beauveria bassiana)是重要的广谱昆虫病原真菌，在侵染昆虫过程中会产生多种次级代谢产物，包括卵孢素、白僵菌素等。这些次级代谢物具有杀虫、抗生素、干扰宿主免疫反应等活性，在昆虫病原真菌与宿主及环境互作过程中发挥了重要作用。研究表明，球孢白僵菌在致死宿主后会合成卵孢素抑制死亡虫体上细菌的生长，保障真菌能充分利用虫体营养进行生长及产孢。卵孢素是一种红色的二苯醌色素，对部分真菌、细菌等都具有明显的抑制作用，同时也具有抗肿瘤活性(Mao  et al., 2010)，其活性机制主要是通过还原反应改变蛋白质和氨基酸上的巯基，从而使酶失活或者抑制ATPase活性。卵孢素也可以抑制Herpes simplex病毒－IDNA聚合酶的活性，从而抑制病毒活性（Strasser  et al., 2000）。此外，研究发现卵孢素也具有杀虫活性。尽管卵孢素在医药领域及害虫防治等领域具有广阔的应用前景，但卵孢素人工合成的成本较高，还没法进行大规模的生产。

球孢白僵菌中卵孢素由一个聚酮合成酶(PKS)基因簇(OPS合成基因簇)合成。该基因簇包含7个相关基因，其中 ops3是该基因簇中的转录因子，能正调控基因簇上其它基因的表达，从而促进卵孢素的产生。但奇怪的是， ops3^OE菌株仅在营养丰富的培养基中合成卵孢素（如SDB和PDB），而在营养贫瘠的CZB培养基中产量极低或不产卵孢素。而PDB和SDB培养基价格昂贵，如要利用生物发酵的方法大量获得卵孢素，选择价格低廉的CZB培养基（仅含有基本盐和蔗糖）则具有优势。因此提供一种能够在CZB培养基中大量合成卵孢素的球孢白僵菌菌株是非常必要的。

发明内容

针对现有技术存在的上述不足，本发明的目的在于提供一种产卵孢素球孢白僵菌菌株，

用于在CZB培养基中大量合成卵孢素，解决人工合成卵孢素成本较高，难以进行大规模生产的技术问题。

为了解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是这样的：

一种产卵孢素球孢白僵菌菌株，为 ΔBbbgli1-ops3^OE菌株，该菌株由超表达 ops3基因后，再敲除 Bbbgli1基因得到的。