[发明专利]鼠李糖乳杆菌GS014及其在改善和调节肠道菌群中的应用

权利要求书

1.一株鼠李糖乳杆菌GS014，其特征在于，该鼠李糖乳杆菌(lactobacillusrhamnosus)GS014，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCCNO.23646，保藏日期为2021年10月22日，保藏机构地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。

2.一种包含如权利要求1所述的鼠李糖乳杆菌GS014的冻干粉。

3.一种制备如权利要求2所述的冻干粉的方法，其特征在于，具体步骤如下：

(1)菌种活化

将鼠李糖乳杆菌GS014保藏菌株接种至已灭菌的固体MRS培养基上，于37℃厌氧恒温培养箱中培养12-36h；

(2)种子培养

将步骤(1)培养好的鼠李糖乳杆菌GS014挑选1-5个单菌落接种至已灭菌的液体MRS培养基中，于37℃静置恒温培养12-24h；

(3)发酵培养

将步骤(2)培养好的种子液按照1％-5％的接种量转接至已灭菌的改良MRS培养基中，于37℃，50-200rpm，厌氧培养12-36h，培养过程中控制发酵液中葡萄糖的浓度≤0.5g/L，通过流加氨水控制发酵液pH值为6.0-7.0，得到高密度的鼠李糖乳杆菌GS014发酵液；

(4)浓缩

发酵结束后，立即将发酵液降温至4-10℃，用20nm的微滤膜进行过滤，当浓缩至原体积的三分之一时，补加等量体积的4-10℃的纯化水；过滤过程观察滤出液为无色；收集菌体，获得鼠李糖乳杆菌GS014浓缩液；

(5)复配

根据步骤(4)浓缩液中鼠李糖乳杆菌GS014的含量，添加适量的冻干保护剂，充分混合均匀，使物料得以乳化；

(6)干燥

将步骤(5)物料均匀的涂布于不锈钢冻干盘中，进行真空冷冻干燥，获得冻干粉。

4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述的步骤(3)中的改良MRS培养基配方为：酵母浸粉10g/L，酵母蛋白胨5g，葡萄糖10g/L，K₂HPO₄2g/L，KH₂PO₄1g/L，MgSO₄·7H₂00.5g/L，乙酸钠5g/L，柠檬酸二胺2g/L，硫酸亚铁0.05g/L，硫酸锰0.05g/L，VB₁₂0.005g/L，烟酰胺0.005g/L，生物素0.005g/L，盐酸硫铵0.005g/L，pH6.5-6.8。

5.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中，改良MRS培养基灭菌条件为：115-118℃，15-25min。

6.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中，厌氧培养为：发酵罐中通入无菌的CO₂，控制罐压为0.01-0.03Mpa。

7.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中，控制发酵液葡萄糖浓度是通过间歇流加60％-70％葡萄糖溶液实现的。

8.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(5)中，冻干保护剂为：5％-10％海藻糖、10％-15％低聚木糖、10％-20％聚葡萄糖、5％-10％菊粉、0.5％-1％硅酸钙。

9.一种如权利要求1所述的鼠李糖乳杆菌GS014在制备抑制肠道中有害菌群产品中的应用。

10.如权利要求9所述的应用，其特征在于，所述有害菌群包括大肠埃希杆菌、痢疾杆菌、产气荚膜杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、厌氧性球菌或绿脓杆菌。